結核分枝桿菌核酸檢查包含多種技術，如結核分枝桿菌環介導等溫擴增檢測、結核分枝桿菌交叉引物等溫擴增檢測、結核分枝桿菌RNA實時熒光等溫擴增檢測、多色巢式實時熒光定量擴增檢測、熒光探針實時熒光定量擴增檢測等，應嚴格按照每種檢測技術的產品說明進行。結核分枝桿菌核酸檢查選取一份性狀好的痰標本進行。

結核分枝桿菌核酸檢查應按照產品的具體操作步驟及整合程度在適宜的實驗室分區及空間內進行，人員應接受過相關培訓，并嚴格按照產品說明進行。

應按照采取的檢測方法不同設置適宜的房間和區域。必要時各個區域應配備2～8℃及-20℃冰箱儲存檢測試劑、核酸等。

不能使用過期試劑，按照每批次工作量對試劑進行分裝或按照廠家推薦進行試劑的配制和分裝，避免試劑反復凍融。

根據具體試劑操作說明決定是否需要提前取出試劑進行室溫平衡，取試劑時將試劑瞬時離心確保液體不丟失，各成分配制后須充分混勻，避免取出試劑內成分濃度不均一。

核酸提取是決定擴增檢測成敗的關鍵性步驟，取標本時選取樣品中性狀好（膿性、干酪痰）的部分，至少取1ml痰標本。

遇到可能存在擴增抑制劑的標本（如血痰），須用緩沖液（0.9%生理鹽水）清洗一次樣本。

確保細菌裂解的時間和溫度一定要足夠，溫度按照推薦溫度進行（一般裂解溫度為95～100℃）。

提取的核酸標本如未能立即進行擴增，應放-20℃冰箱保存。

擴增設備的溫度要定期校準，確保擴增溫度的準確性。擴增設備的擴增孔可定期清潔，可使用棉簽蘸取10%含氯試劑擦拭，含氯試劑擦拭后應及時用蒸餾水和酒精擦拭避免腐蝕擴增設備。

每批次必須加入陽性、陰性質控樣品。陰性質控即無樣本對照，用于監測污染。陽性質控用于檢測儀器、試劑、核酸提取及擴增過程中產生的誤差。

需要進行雜交等擴增后產物分析的一定要在獨立房間進行，避免發生擴增子交叉污染。

結果判讀嚴格按照檢測方法的推薦判讀方法進行判讀，判讀結果應首先判讀陰性對照和陽性對照結果，對照結果符合質控要求時本次實驗結果才有效。同時結果報告應由審核人進行進一步審核。

每次開展分子檢測后應進行后續的去污染操作，包括但不僅限下面幾種：用10%含氯消毒劑擦拭實驗臺面、儀器等，在擦拭后用水再次擦拭；試驗后使用紫外線照射實驗操作臺表面（照射距離60～90cm之內，推薦照射過夜）。

每月定期匯總分析反映結核分枝桿菌分子生物學檢測工作的質量指標，連續監測各指標，指標值出現明顯變化應立即查詢原因，并盡快解決。

結核分枝桿菌分子生物學檢測質量指標包括結核分枝桿菌核酸檢測陽性比例、檢測發生批次污染比例（針對分批量操作的檢測）、檢測發生錯誤、無結果、無效比例、結核分枝桿菌核酸檢測實驗室周轉時間。

結核分枝桿菌核酸檢測陽性比例=結核分枝桿菌核酸陽性標本數量/開展結核分枝桿菌核酸檢查的標本數量

結核分枝桿菌核酸檢測發生批次污染的比例=結核分枝桿菌核酸檢測發生污染的批次/結核分枝桿菌核酸檢測的批次

檢測發生錯誤（無結果或無效）的比例=檢測發生錯誤（無結果或無效）的標本數量/開展多色巢式實時熒光定量PCR檢測的標本數量

結核分枝桿菌核酸檢測實驗室周轉時間=實驗室自收到痰標本至報告結核分枝桿菌核酸檢測結果的時間間隔