2.1.3　指標分析

發酵體系樣品用兩層紗布過濾后，固渣中TS和VS含量根據APHA[150]方法分別在105℃和550℃溫度下分析，計算降解率；固渣通過脫水、干燥及金屬鍍膜后用SEM觀察。發酵前后秸稈中纖維素、半纖維素及木質素含量用A2000i纖維分析儀（ANKOM，美國）測定，中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）及酸不溶性木質素（ADL）殘渣都在65℃干燥箱中烘至恒重。

液體部分在12000r/min下離心10min，上清液用于pH、VFAs濃度和酶活性測定，每個指標重復三次。使用DELTA 320 pH計測定（梅特勒-托利多儀器，美國）。VFAs測定前用0.83g/L 4-甲基戊酸、3mol/L磷酸和樣品按同體積混合后4800r/min離心10min；所得上清液使用GC-2010 Plus氣相色譜（島津，日本）測定VFAs（主要包含乙酸、丙酸和丁酸），色譜配備Stabiwax-DA毛細管柱（30m×0.32mm×0.5μm，大連中匯達科學儀器，中國）和火焰離子化檢測器（FID）。程序包括初溫80℃，3min；然后以15℃/min的速率升至210℃，2min；進樣和檢測器溫度設為250℃[151]。纖維素酶和木聚糖酶活性測定根據Sambusiti等（2014）方法測定[148]，單位為U/mL。每毫升每分鐘上清液釋放1 μg葡萄糖（木糖）的酶量定義為1個酶活力單位（U）。