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3.2 儀器結構與原理

熒光分光光度計主要由光源、激發單色器(第一單色器)、樣品池、發射單色器(第二單色器)、檢測器和信號記錄與顯示系統等組成,其基本結構如圖3-4所示。

圖3-4 熒光分析儀器結構示意圖

由光源發出的光經第一單色器分光后入射到樣品池上,產生的熒光經第二單色器分光后進入檢測器,檢測器把熒光強度信號轉化成電信號并經過放大器放大后,經信號記錄與顯示系統輸出信號。通常在激發單色器與樣品池之間及樣品池與發射單色器之間還裝有各種濾光片,為了消除或減小Rayleigh散射光及拉曼散射等因素的影響。在更高級的熒光儀器中,激發和發射裝置之間安裝偏振片以備熒光偏振測量時選用。

3.2.1 光源

熒光物質的熒光強度與激發光的強度成正比,作為一種理想的激發光源應具備:①足夠的強度;②在所需光譜范圍內有連續的光譜;③其強度與波長無關;④光強要穩定。

常見的光源有氙燈和高壓汞燈。也有熒光光譜儀使用脈沖氙燈,氙燈需要優質電源,以保持氙燈的穩定性和延長其使用壽命。此外,激光器也可用作激發光源,它可提高熒光測量的靈敏度。

3.2.2 單色器

熒光分光光度計的單色器通常有光柵和棱鏡兩種,用得最多的是光柵單色器。

3.2.3 樣品池

熒光用的樣品池必須用弱熒光的材料制成,因光源發出的光和比色皿之間是90°的關系,通常用四面透光的石英,形狀以方形和長方形為宜。

3.2.4 檢測器

熒光的強度一般較弱,所以要求用于熒光的檢測器具有較高的靈敏度。現代熒光光譜儀中普遍使用光電倍增管作為檢測器,新一代熒光光譜儀中使用了電荷耦合器件檢測器,可一次獲得熒光二次光譜。

3.2.5 信號記錄和顯示系統

現在大部分熒光分光光度計都配有計算機,可利用相關軟件,通過計算機對操作進行控制,也可對數據進行相關處理。

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