- 木質纖維生物質的酶糖化技術
- 楊靜 鄧佳 史正軍
- 409字
- 2020-04-10 16:50:38
2.2 原材料
玉米秸稈收集于內蒙古自治區呼和浩特市。蒸汽爆破預處理:玉米秸稈在3L蒸汽爆破器中于1.9MPa下保溫9min后瞬間噴放,爆破料經充分洗滌后作為產酶碳源和酶水解底物,4℃冰箱保存備用;絕干蒸汽爆破玉米秸稈含纖維素45.1%、木聚糖3.9%、木質素23.2%。稀酸預處理:玉米秸稈于0.75%(質量分數)的稀硫酸、121℃下處理1h,洗滌后作為產酶碳源和酶解底物,4℃冰箱保存備用;絕干稀酸處理玉米秸稈含纖維素60.1%、木聚糖6.6%、木質素25.2%。
自產纖維素酶產酶菌株為里氏木霉Rut C30,商品纖維素酶購自Sigma公司(上海),其濾紙酶活和β-葡萄糖苷酶酶活分別為128.10FP IU/mL和27IU/mL。SDS-PAGE凝膠電泳的儲存液和緩沖液包括:丙烯酰胺凝膠貯備液、分離膠緩沖液、濃縮膠緩沖液、電極緩沖液、樣品溶解液、10%過硫酸銨、N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(TEMED)、固定液、考馬斯亮藍R-250染色液和脫色液。雙向電泳分析的實驗試劑包括:水化上樣液、膠條平衡緩沖液母液、電泳緩沖液、瓊脂糖封膠液、固定液、敏化液、硝酸銀染色液、顯色劑和終止液。