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第2章 纖維素酶的制備

2.1 引言

木質纖維生物質是世界上最豐富的可再生資源,其生物量是淀粉質原料的1000倍,而人類對其利用率不足10%。我國的木質纖維原料中僅農作物秸稈和皮殼,每年產量就達7億多噸,林業副產品、城市垃圾和工業廢物數量也很可觀。木質纖維原料中的纖維素可被纖維素酶降解為葡萄糖,而葡萄糖是發酵工業和許多化學工業及其他工業部門的重要原料,在這一過程中,纖維素酶生產費用是最昂貴的,大約占燃料乙醇生產總成本的40%[1]。里氏木霉(Trichoderma reesei)是國際上公認的纖維素酶生產菌株之一,也是植物纖維原料生物轉化制取燃料乙醇工藝中最具工業應用前景的微生物[2]。因此,里氏木霉利用廉價的木質纖維生物質作為碳源,制備適用于可再生能源生產需要的高催化活性、低成本的纖維素酶,是目前生物質能源研究領域的熱點。

下面以里氏木霉Rut C30為產纖維素酶菌株,蒸汽爆破玉米秸稈、紙漿和稀酸預處理的玉米秸稈為碳源制備纖維素酶,比較不同碳源纖維素酶的酶活的差異;采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳和雙向電泳技術,分析不同碳源制備的纖維素酶蛋白表達的差異,根據等電點和分子量與前人純化的里氏木霉分泌蛋白數據匹配,尋找自產纖維素酶與商品纖維素酶蛋白在糖化性能上的差異。

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