對(duì)大豆微觀結(jié)構(gòu)的了解對(duì)于大豆油脂的提取有著重要的意義,大豆是雙子葉植物,大部分的蛋白和油脂儲(chǔ)存在子葉組織中的亞細(xì)胞器中,稱為大豆蛋白質(zhì)體和大豆油體(也稱油體蛋白)。蛋白體占據(jù)了子葉細(xì)胞的大部分空間(Bair C W,1979)。大豆油體的直徑遠(yuǎn)小于蛋白質(zhì)體,位于蛋白質(zhì)體之間的空隙中(Wolf W J,1970)。大豆子葉透射電鏡顯微圖見(jiàn)圖1-3,典型大豆子葉呈現(xiàn)圓柱形,直徑為30μm,長(zhǎng)度有70~80μm,為了充分地破壞子葉細(xì)胞,粉碎的粒度需要小于這個(gè)尺寸才可以有效地破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)(Deak等,2004;齊寶坤,2013)。
圖1-3 大豆種子與子葉細(xì)胞的透射電鏡圖(Campbell KA等,2010)
CW—細(xì)胞壁;PB—蛋白質(zhì)體;N—細(xì)胞核;OB—油體
植物油料細(xì)胞壁是植物細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu),主要由纖維素、半纖維素、木質(zhì)素和果膠等物質(zhì)組成,油料細(xì)胞表面堅(jiān)韌的細(xì)胞壁將油脂、蛋白質(zhì)等物質(zhì)包裹在內(nèi),在細(xì)胞內(nèi),油脂通常與其他大分子結(jié)合,構(gòu)成脂多糖和脂蛋白等復(fù)合體,油脂及其伴隨物是以極小直徑的球形“油脂體”存在的,每個(gè)油脂體外面都由一層蛋白質(zhì)為主要成分的邊界膜包圍著(譚春蘭,2006),由于油脂被細(xì)胞壁所包圍著,有研究表明(Campbell KA等,2009),細(xì)胞壁是從大豆中提取油脂和蛋白的主要屏障,因此任何物質(zhì)的提取都需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎(Rosenthal A等,1996)。大豆細(xì)胞壁為雙層,大豆的第一層細(xì)胞壁由果膠、半纖維素、交聯(lián)著蛋白的纖維微管束構(gòu)成,這層由果膠構(gòu)成的膜層將子葉細(xì)胞連接在一起(Kasai N等,2003);第二層細(xì)胞壁是由纖維素、半纖維素構(gòu)成(Dominguez等,1994)。通過(guò)胞間連絲將物質(zhì)越過(guò)細(xì)胞壁屏障發(fā)生傳遞,胞間連絲是細(xì)胞壁中的微小開(kāi)口,直徑為20~80nm(Johnson L A,2008)。
Tzen和Huang(Tzen J T et a.l 1992)于1992年提出的油脂體結(jié)構(gòu)模型,分析了油脂體的分布規(guī)律及其存在狀態(tài)(圖1-4),認(rèn)為油脂體內(nèi)部主要為三酰甘油(TAG)的液態(tài)基質(zhì)[圖1-4(a)],外部則為磷脂單分子層及嵌入其內(nèi)的油脂體結(jié)合蛋白組成的半單位膜,這個(gè)半單位膜的基本單位是由13個(gè)磷脂分子和1個(gè)油脂體結(jié)合蛋白分子組成[圖1-4(c)],鑲嵌于半單位膜上的油脂體蛋白分子主要為油素蛋白,其疏水區(qū)域?yàn)殚L(zhǎng)約11nm的柄狀結(jié)構(gòu)[圖1-4(b)]。因此,只有將油料組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和油脂復(fù)合體破壞,才能將有效的成分(油脂、蛋白及功能性成分等)提取出來(lái)。