第一章　緒論

第一節(jié)　常用儀器設(shè)備的使用

生物技術(shù)是涉及基因工程、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、細胞生物學(xué)、胚胎學(xué)、免疫學(xué)、有機化學(xué)、無機化學(xué)、物理化學(xué)、物理學(xué)、信息學(xué)及計算機科學(xué)等的多學(xué)科技術(shù)，其中不乏使用有毒化學(xué)藥品及微生物，因此，在實驗操作過程中要嚴格遵守實驗室操作規(guī)范。

一、離心機

離心機是生物實驗室常用的儀器設(shè)備，可以利用離心力將懸浮的固體顆粒與液體分開；或?qū)⑷闈嵋褐袃煞N密度不同又互不相溶的液體分開；也可用于排除濕固體中的液體。離心機如圖1-1所示。

1.工作原理

離心機的作用原理有離心過濾和離心沉降兩種。離心過濾是使懸浮液在離心力場下產(chǎn)生的離心壓力作用在過濾介質(zhì)上，使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液，而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面，從而實現(xiàn)液-固分離；離心沉降是利用懸浮液（或乳濁液）密度不同的各組分在離心力場中迅速沉降分層的原理，實現(xiàn)液-固（或液-液）分離。衡量離心機分離性能的重要指標是分離因數(shù)。它表示被分離物料在轉(zhuǎn)鼓內(nèi)所受的離心力與其重力的比值，分離因數(shù)越大，通常分離也越迅速，分離效果越好。

2.使用守則

①離心機在預(yù)冷狀態(tài)時，離心機蓋必須關(guān)閉，離心結(jié)束后取出轉(zhuǎn)頭要倒置于實驗臺上，擦干腔內(nèi)余水，離心機蓋處于打開狀態(tài)。

②轉(zhuǎn)頭在預(yù)冷時轉(zhuǎn)頭蓋可擺放在離心機的平臺上，或擺放在實驗臺上，千萬不可不擰緊浮放在轉(zhuǎn)頭上，因為一旦誤啟動，轉(zhuǎn)頭蓋就會飛出，造成事故！

③轉(zhuǎn)頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉(zhuǎn)頭與轉(zhuǎn)蓋之間有無縫隙，如有縫隙要擰開重新擰緊，直至確認無縫隙方可啟動離心機。

④在離心過程中，操作人員不得離開離心機室，一旦發(fā)生異常情況，操作人員不能關(guān)電源（POWER），要按STOP。在預(yù)冷前要填寫好離心機使用記錄。

⑤不得使用偽劣的離心管，不得用老化、變形、有裂紋的離心管。

⑥在節(jié)假日和晚間最后一個使用離心機的人例行安全檢查后方能離去。

3.使用注意事項

目前，實驗室常用的是電動離心機，電動離心機轉(zhuǎn)動速度快，要注意安全，特別要防止在離心機運轉(zhuǎn)期間，因不平衡或試管墊老化而使離心機邊工作邊移動，以致從實驗臺上掉下來，或因蓋子未蓋，離心管因振動而破裂后，玻璃碎片旋轉(zhuǎn)飛出，造成事故。因此，使用離心機時，必須注意以下操作。

①離心機套管底部要墊棉花或試管墊。

②電動離心機如有噪聲或機身振動時，應(yīng)立即切斷電源，即時排除故障。

③離心管必須對稱放入套管中，防止機身振動，若只有一支樣品管，另外一支要用等質(zhì)量的水代替。

④啟動離心機時，應(yīng)蓋上離心機頂蓋后，方可慢慢啟動。

⑤分離結(jié)束后，先關(guān)閉離心機，在離心機停止轉(zhuǎn)動后，方可打開離心機蓋，取出樣品，不可用外力強制其停止運動。

⑥離心時間一般為1～2min，在此期間，實驗者不得離開去做別的事。

二、移液管

移液管是一種量出式儀器，如圖1-2所示，只用來測量它所放出溶液的體積。它是一根中間有一膨大部分的細長玻璃管，其下端為尖嘴狀，上端管頸處刻有一條標線，是所移取的準確體積的標志。常用的移液管有5mL、10mL、25mL和50mL等規(guī)格。通常又把具有刻度的直形玻璃管稱為吸量管。常用的吸量管有1mL、2mL、5mL和10mL等規(guī)格。移液管和吸量管所移取的體積通常可準確到0.01mL。

移液管的使用步驟如下。

（1）使用前　使用移液管，首先要看一下移液管標記、準確度等級、刻度標線位置等。使用移液管前，應(yīng)先用鉻酸洗液潤洗，以除去管內(nèi)壁的油污。然后用自來水沖洗殘留的洗液，再用蒸餾水洗凈。洗凈后的移液管內(nèi)壁應(yīng)不掛水珠。移取溶液前，應(yīng)先用濾紙將移液管末端內(nèi)外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗管壁2～3次，以確保所移取溶液的濃度不變。

（2）吸液　用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，將管的下口插入欲吸取的溶液中，插入不要太淺或太深，一般為10～20mm處，太淺會產(chǎn)生吸空，把溶液吸到洗耳球內(nèi)弄臟溶液，太深又會在管外沾附溶液過多。左手拿洗耳球，先把球中空氣壓出，再將球的尖嘴接在移液管上口，慢慢松開壓扁的洗耳球使溶液吸入管內(nèi)，先吸入該管容量的1/3左右，用右手的食指按住管口，取出，橫持，并轉(zhuǎn)動管子使溶液接觸到刻度以上部位，以置換內(nèi)壁的水分，然后將溶液從管的下口放出并棄去，如此用溶液反復(fù)洗3次后，即可吸取溶液至刻度以上，立即用右手的食指按住管口。

（3）調(diào)節(jié)液面　將移液管向上提升離開液面，管的末端仍靠在盛溶液器皿的內(nèi)壁上，管身保持直立，略微放松食指（有時可微微轉(zhuǎn)動吸管）使管內(nèi)溶液慢慢從下口流出，直至溶液的彎月面底部與標線相切為止，立即用食指壓緊管口。將尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管，插入承接溶液的器皿中。

（4）放出溶液　承接溶液的器皿如是錐形瓶，應(yīng)使錐形瓶傾斜30°，移液管直立，管下端緊靠錐形瓶內(nèi)壁，稍松開食指，讓溶液沿瓶壁慢慢流下，全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管，以便使附著在管壁的部分溶液得以流出。如果移液管未標明“吹”字，則殘留在管尖末端內(nèi)的溶液不可吹出，因為移液管所標定的量出容積中并未包括這部分殘留溶液。

三、移液器

移液器又稱移液槍（pipettes或transferpette），是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的儀器，被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域，如圖1-3所示。

1.工作原理

移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸液和放液。在活塞推動下，排出部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排出液體。使用移液器時，配合彈簧的伸縮性特點來操作，可以很好地控制移液的速度和力度。

2.使用步驟

一個完整的移液循環(huán)，包括吸頭安裝—容量設(shè)定—預(yù)洗吸頭—吸液—放液—卸掉吸頭等六個步驟。每一個步驟都有需要遵循的操作規(guī)范。

（1）吸頭安裝　采用旋轉(zhuǎn)安裝法安裝吸頭，具體的做法為，把移液器白套筒頂端插入吸頭（無論是散裝吸頭還是盒裝吸頭都一樣），在輕輕用力下壓的同時，把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180°。

（2）容量設(shè)定　采用兩步法設(shè)定移液器容量，一是粗調(diào)，即通過排放按鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值；二是細調(diào)，當(dāng)容量值接近自己的預(yù)想值以后，應(yīng)將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值，從而避免視覺誤差所造成的影響。

（3）預(yù)洗吸頭　在我們安裝了新的吸頭或增大了容量值以后，應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放2～3次，使吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜，確保移液工作的精度和準度，使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。其次，在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時，揮發(fā)性氣體會在白套筒室內(nèi)形成負壓，從而產(chǎn)生漏液的情況，這時就需要我們預(yù)洗4～6次，讓白套筒室內(nèi)的氣體達到飽和，負壓就會自動消失。

（4）吸液　先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將吸頭垂直浸入液面，浸入的深度為：P2、P10小于或等于1mm，P20、P100、P200小于或等于2mm，P1000小于或等于3mm，P5mL、P10mL小于或等于4mm，平穩(wěn)松開按鈕，切記不能過快。

（5）放液　放液時，吸頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略做停頓以后，再按至第二停點，這樣做可以確保吸頭內(nèi)無殘留液體。

（6）卸掉吸頭　卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放，以免產(chǎn)生交叉污染。

3.使用注意事項

①設(shè)定移液體積：從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積（這是因為計數(shù)器里面有一定的空隙，需要彌補），這樣可以保證移液器的精確度。

②裝配移液槍頭：將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。切記用力不能過猛，用移液器撞擊吸頭，長期這樣操作會導(dǎo)致移液器的零件因撞擊而松散，嚴重時會導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。

③吸液及放液：吸液時，浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產(chǎn)生一定的影響。吸液前槍頭先在液體中預(yù)潤洗，慢吸慢放，放液時如果量很小則應(yīng)使吸頭尖端靠容器內(nèi)壁。

④吸有液體的移液槍不應(yīng)平放，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而導(dǎo)致槍的彈簧生銹。

⑤移液槍在每次實驗后應(yīng)將刻度調(diào)至最大，讓彈簧回復(fù)原型以延長移液槍的使用壽命。

⑥吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。

⑦為獲得較高的精度，吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時，吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”，造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。

⑧濃度和黏度大的液體，會產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。

⑨在設(shè)置量程時，請注意旋轉(zhuǎn)到所需量程數(shù)字清清楚楚地顯示在顯示窗中，所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程，否則會卡住機械裝置，損壞移液器。

⑩移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機物等）。

嚴禁使用移液器吹打混勻液體。

不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準確度。同時，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請使用移液管進行操作。

四、高壓滅菌鍋

高壓滅菌鍋（全自動高壓蒸汽滅菌鍋見圖1-4）適用于醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)、科研、農(nóng)業(yè)等單位，可用于醫(yī)療器械、敷料、玻璃器皿、溶液培養(yǎng)基等的消毒滅菌。

1.使用步驟

（1）開蓋　向左轉(zhuǎn)動手輪數(shù)圈，直至轉(zhuǎn)動到頂，使鍋蓋充分提起，拉起左立柱上的保險銷，向右推開橫梁，移開鍋蓋。

（2）通電　接通電源，此時欠壓蜂鳴器響，顯示本機鍋內(nèi)無壓力（當(dāng)鍋內(nèi)壓力升至約0.03MPa時蜂鳴器自動關(guān)閉），控制面板上的低水位燈亮，鍋內(nèi)屬斷水狀態(tài)。

（3）加水　將純水或生活用水直接注入蒸發(fā)鍋內(nèi)約8L，同時觀察控制面板上的水位燈，當(dāng)加水至低水位燈滅、高水位燈亮?xí)r停止加水。當(dāng)加水過多發(fā)現(xiàn)內(nèi)膽有存水，開啟下排汽閥放去內(nèi)膽中的多余水量。

（4）放樣　將滅菌物品儀器堆放在滅菌筐內(nèi)，各包之間留有間隙，有利于蒸汽的穿透，提高滅菌效果。密封：把橫梁推向左立柱內(nèi)，橫梁必須全部推入立柱槽內(nèi)，手動保險銷自動下落鎖住橫梁，旋緊鍋蓋。

（5）設(shè)定溫度和時間　按一下確認鍵，進入溫度設(shè)定狀態(tài)，按上下鍵可以調(diào)節(jié)溫度值，再次按下確認鍵，進入時間設(shè)定狀態(tài)，按左鍵或上下鍵設(shè)置需要的時間，再次按動確認鍵，設(shè)定完成，儀器進入工作狀態(tài)，開始加熱升溫。

（6）滅菌結(jié)束后，關(guān)閉電源，待壓力表指針回落零位后，開啟安全閥或排汽排水總閥，放凈滅菌室內(nèi)的余氣。若滅菌后需迅速干燥，需打開安全閥或排汽排水總閥，讓滅菌器內(nèi)的蒸汽迅速排出，使物品上殘留的水蒸氣快速揮發(fā)。滅菌液體時嚴禁使用干燥方法。

（7）啟蓋　同步驟（1）。

2.使用注意事項

①堆放滅菌包時應(yīng)注意安全閥放汽孔位置必須留出空隙，保障其暢通，否則易造成鍋體爆裂事故。

②滅菌液體時，應(yīng)將液體灌裝在耐熱玻璃瓶中，以不超過3/4體積為好，瓶口選用棉花紗塞。

③對高壓滅菌鍋進行補水時盡量使用純水，以防產(chǎn)生水垢。

五、PCR儀的使用

PCR（polymerase chain reaction，聚合酶鏈反應(yīng)），是在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法，只需在試管中建立反應(yīng)，經(jīng)數(shù)小時后，就能將極其微量的目的基因或某一特定DNA片段擴增數(shù)十倍到千百萬倍。PCR技術(shù)可用于分離和擴增目的基因、基因突變檢測、疾病診斷等領(lǐng)域。

1.PCR技術(shù)原理

在微量離心管中，加入適量的緩沖液，微量的模板DNA、四種脫氧單核苷酸、耐熱性多聚酶和引物，通過高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個階段為一個循環(huán)的反應(yīng)過程，每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍，一般樣品經(jīng)過30次循環(huán)，最終使基因放大了數(shù)百萬倍（圖1-5）。

2.PCR儀的使用

本書僅以BioRad T100 PCR儀為例（圖1-6），簡單介紹PCR儀的使用，不同廠家生產(chǎn)的PCR儀的使用參考廠家所提供的說明書進行。

（1）創(chuàng)建新程序

①主菜單上點擊New Protocol。

②NewProtocol界面顯示圖形視圖模式的程序。點擊相應(yīng)的按鍵設(shè)定對應(yīng)的參數(shù)：溫度、時間、循環(huán)數(shù)、GOTO循環(huán)開始步驟、樣品體積、熱蓋溫度。

③如果想選擇一個步驟，點擊溫度鍵以外的空白區(qū)域，該步驟會高亮顯示。此時可在該步驟后增加新步驟、刪除所選步驟或重新輸入該步驟的參數(shù)。

④點擊Insert按鍵增加實驗步驟。菜單會顯示所需增加的步驟類型。溫度固定的步驟選擇Temperature，溫度梯度步驟選擇Gradient，典型循環(huán)步驟（變性、退火和延伸）選擇GOTO。

⑤點擊Delete，刪除實驗步驟。

⑥如果實驗步驟需要設(shè)置高級參數(shù)，如溫度、增減溫度、時間、延伸時間、梯度和升降溫速率，請點擊Options。

⑦點擊Save保存程序。

⑧點擊Run運行程序。如果無需保存，可在設(shè)置Run過程中隨時點擊開始運行。

（2）運行和保存已有程序

①在主界面選擇Saved Protocols。T100 PCR儀支持程序文件夾管理系統(tǒng)，Main文件夾內(nèi)預(yù)裝20個標準程序。

②在文件夾列表內(nèi)選擇文件夾，在所選文件夾內(nèi)選擇需要的程序。

③在右側(cè)預(yù)覽欄可以預(yù)覽所選程序。

④點擊Run開始運行程序，或選擇Edit編輯所選程序。

3.PCR儀使用注意事項

①PCR儀使用的環(huán)境要恒定，工作環(huán)境的溫度不能過高或過低，最好在有空調(diào)的房間使用，有些PCR儀有溫度保護程序，在過低的溫度下機器不能啟動。

②PCR儀使用的電源要穩(wěn)定，工作的電壓不能波動過大，波動過大會造成電子器件損壞，一般建議將PCR儀電源接于穩(wěn)壓電源上。

③PCR儀在使用前要詳細閱讀使用說明書，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸機器，應(yīng)該讓生產(chǎn)廠商負責(zé)售后服務(wù)的專業(yè)工程師進行處理。

六、超凈工作臺

超凈工作臺（圖1-7）是一種局部凈化設(shè)備，即利用空氣潔凈技術(shù)使一定操作區(qū)內(nèi)的空間達到相對的無塵、無菌狀態(tài)，主要由空氣過濾裝置、紫外殺菌裝置、操作臺三部分構(gòu)成。

1.工作原理

通過風(fēng)機將空氣吸入預(yù)過濾器，經(jīng)由靜壓箱進入高效過濾器過濾，將過濾后的空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域達到百級潔凈度，保證生產(chǎn)對環(huán)境潔凈度的要求。超凈工作臺根據(jù)氣流的方向分為垂直流超凈工作臺和水平流超凈工作臺，根據(jù)操作結(jié)構(gòu)分為單邊操作及雙邊操作兩種形式，按其用途又可分為普通超凈工作臺和生物（醫(yī)藥）超凈工作臺。

2.使用步驟

①檢查超凈工作臺的操作環(huán)境，如環(huán)境溫度、空氣質(zhì)量、電源等，登記使用信息。

②將實驗需要的器材擺放到超凈工作臺臺面上，滅過菌的材料如培養(yǎng)基等放左側(cè)，工具放右側(cè)。

③拉下玻璃擋板，開啟紫外線燈照射30min進行表面滅菌。

④30min后關(guān)閉紫外線燈，打開風(fēng)機調(diào)節(jié)至適當(dāng)?shù)娘L(fēng)量，打開照明燈。

⑤打開玻璃擋板至約20cm高，兩只手在操作臺內(nèi)可以順利操作，用75％酒精擦拭雙手和臺面。

⑥點燃酒精燈，操作過程嚴格遵循無菌操作規(guī)范。

⑦操作完成后將實驗器材清理出無菌操作臺，75％酒精擦拭臺面，關(guān)閉照明、風(fēng)機和擋板。

⑧開啟紫外線燈照射15min后關(guān)閉紫外線燈。

3.使用注意事項

①超凈工作臺內(nèi)嚴禁長時間存放物品。

②紫外線對皮膚和視網(wǎng)膜有很強的刺激性，避免紫外線直射，單層玻璃即可有效阻擋紫外線。

③操作過程應(yīng)嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)范。

④避免頻繁開關(guān)紫外線燈管和照明燈管，延長燈管的使用壽命。

⑤定期檢查空氣濾網(wǎng)等濾材，老化嚴重應(yīng)更換。

七、紫外-可見分光光度計

紫外-可見分光光度法（ultraviolet-visible spectrophotometry）通常是指利用物質(zhì)對200～800nm光譜區(qū)域內(nèi)的光具有選擇性吸收的現(xiàn)象，對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。按測量光的單色程度（即含波長范圍的寬窄程度）分為分光光度法（spectrophotometry）和比色法（colorimetry）。利用比較溶液顏色深淺的方法來確定溶液中有色物質(zhì)的含量的方法稱比色法。應(yīng)用分光光度計，根據(jù)物質(zhì)對不同波長的單色光的吸收程度不同而對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法稱分光光度法（又稱吸光光度法）。分光光度法中，按所用光的波譜區(qū)域不同，又可分為紫外分光光度法和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。在紫外及可見光區(qū)用于測定溶液吸光度的分析儀器稱為紫外-可見分光光度計（簡稱分光光度計，見圖1-8）。

1.工作原理

物質(zhì)的紫外-可見光譜直接地反映了物質(zhì)分子的電子躍遷，與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接相關(guān)，不同的物質(zhì)其紫外-可見吸收光譜不同，而吸收強弱又與吸光物質(zhì)的量有關(guān)。因此，可以由物質(zhì)光譜的特異性對物質(zhì)進行定性分析，并根據(jù)吸收強度對物質(zhì)做定量測試。

在一定的條件下，吸光物質(zhì)對單色光的吸收符合朗伯-比爾定律，即A=εbc［A為吸光度；b為光程長度（即吸收池厚度），cm；c為吸光物質(zhì)的物質(zhì)的量濃度，mol/L；ε為摩爾吸光系數(shù)，L/（mol·cm）］；當(dāng)b、ε一定時，吸光物質(zhì)的吸光度為其濃度c的單值（線性）函數(shù)。因此，對吸光物質(zhì)的濃度的測試可直接歸結(jié)為對吸光度A的測試。

2.使用步驟

①取下防塵罩，將靈敏度調(diào)節(jié)鈕置于“1”擋（信號放大倍率最小），將選擇開關(guān)置于“τ”擋。

②打開試樣室蓋，檢查樣品室內(nèi)是否放有遮光物，若有則取出。插上電源插頭，按下電源開關(guān)，指示燈亮，儀器預(yù)熱20min。

③調(diào)節(jié)波長旋鈕，使測試所需波長值對準標線。

④在試樣室蓋打開的情況下，調(diào)節(jié)“0％τ”旋鈕，使顯示器顯示為“000.0”。

⑤用所要裝盛的溶液潤洗潔凈的吸收池后，倒入相應(yīng)的溶液（注意！溶液不可裝太滿，以免逸出腐蝕儀器，一般裝至池高的2/3～4/5即可），用濾紙吸干吸收池外壁水珠；用擦鏡紙擦亮透光面。將盛參比溶液的吸收池置于試樣架的第一格內(nèi)（靠操作者身邊），盛試樣的吸收池按試樣編號依次置于第二、三、四格內(nèi)，用彈簧夾固定好，蓋上試樣室蓋。

⑥將參比溶液推入光路，調(diào)節(jié)“100％τ”旋鈕，使之顯示為“100.0”，如果顯示不到“100.0”則要增大靈敏度擋，然后再調(diào)節(jié)“100％τ”旋鈕，直到顯示為“100.0”。

⑦重復(fù)操作④和⑤，直到顯示穩(wěn)定。

⑧穩(wěn)定地顯示“100.0”透射比后，將選擇開關(guān)置于“A”擋，此時吸光度顯示應(yīng)為“.000”；若不是，則調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零鈕，使顯示為“.000”。將試樣推入光路，這時的顯示值即試樣的吸光度。

⑨若測量濃度c，先將選擇開關(guān)旋至“C”擋，將已知濃度的溶液推入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使數(shù)字顯示器顯示為標定值，再將被測溶液推入光路，則顯示值即為被測溶液相應(yīng)的濃度值。

⑩儀器使用完畢，關(guān)閉電源（短時間不用，不必關(guān)閉電源，只需打開試樣室蓋，即停止照射光電管），洗凈吸收池并放回原處，儀器冷卻10min后蓋上防塵罩。

3.操作注意事項

①實驗過程中，參比溶液不要拿出試樣室，可隨時將其置入光路以檢查吸光度零點是否有變化。如不為“.000”，則不要先調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零鈕，而應(yīng)將選擇開關(guān)置于“τ”擋，用“100％τ”旋鈕調(diào)至“100.0”，再將選擇開關(guān)置于“A”，這時如不為“.000”方可調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零鈕（一般情況下不需要經(jīng)常調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零鈕和“0％τ”旋鈕）。

②實驗過程中，若大幅度改變測試波長，需等數(shù)分鐘才能正常工作（因波長大幅度改變，光能量變化急劇，光電管響應(yīng)遲緩，需一段光響應(yīng)平衡時間）。