第五節(jié) 注射劑的制備

一、注射劑的制備工藝流程

目前，臨床上使用的注射劑包括小容量注射劑、輸液和粉針劑等，本節(jié)主要討論小容量注射劑，其工藝流程如圖3-15所示。

二、注射劑的容器和處理方法

（一）注射劑容器的種類

注射劑的容器主要是由硬質(zhì)中性玻璃制成的安瓿或其他式樣的容器（如青霉素小瓶、輸液瓶等），其外形如圖3-16所示。安瓿的式樣主要有曲頸安瓿及粉末安瓿，容積通常為1、2、5、10、20mL等幾種規(guī)格。新開發(fā)的一種兩室玻璃小瓶（圖3-1 6）特別適于在溶液中不穩(wěn)定的藥物。容器由上下兩個隔室組成，上裝注射用溶劑，下裝無菌粉末，中間以特殊薄膜隔開。

（二）安瓿的質(zhì)量與注射劑穩(wěn)定性的關(guān)系

安瓿用來灌裝各種性質(zhì)不同的注射劑，不僅在制造過程中需經(jīng)高溫滅菌，而且應(yīng)適合在不同環(huán)境下長期儲藏。玻璃質(zhì)量有時能影響注射劑的穩(wěn)定性，如導(dǎo)致pH值改變、沉淀、變色、脫片等。因此，注射劑玻璃容器應(yīng)達到以下質(zhì)量要求：①應(yīng)無色透明，以利于檢查藥液的澄明度、雜質(zhì)以及變質(zhì)情況；②應(yīng)具有低的膨脹系數(shù)、優(yōu)良的耐熱性，使之不易冷爆破裂；③熔點低，易于熔封；④不得有氣泡、麻點及砂粒；⑤應(yīng)有足夠的物理強度，能耐受熱壓滅菌時產(chǎn)生的較高壓力差，并避免在生產(chǎn)、裝運和保存過程中所造成的破損；⑥應(yīng)具有高度的化學(xué)穩(wěn)定性，不與注射液發(fā)生物質(zhì)交換。

（三）安瓿的檢查

為了保證注射劑的質(zhì)量，安瓿必須按藥典要求進行一系列的檢查，包括物理和化學(xué)檢查。

物理檢查內(nèi)容主要包括：安瓿外觀、尺寸、應(yīng)力、清潔度、熱穩(wěn)定性等；化學(xué)檢查內(nèi)容主要有容器的耐酸、堿性和中性檢查等。裝藥試驗主要是檢查安瓿與藥液的相容性，證明無影響方能使用。

（四）安瓿的切割與圓口

安瓿需先經(jīng)過切割，使安瓿頸具有一定的長度，便于灌藥與安裝。切割后的安瓿應(yīng)瓶口整齊，無缺口、裂口、雙線，長短符合要求。切口不好，玻璃碎屑易掉入安瓿，增加洗瓶的難度，影響澄明度。安瓿割口后，頸口截面粗糙，再相互碰撞及洗滌時玻璃屑容易落入安瓿內(nèi)，因此需要圓口。圓口系利用強烈火焰噴烘頸口截面，使熔融光滑。

（五）安瓿的洗滌

安瓿一般使用離子交換水灌瓶蒸煮，質(zhì)量較差的安瓿須用0.5%的醋酸水溶液，灌瓶蒸煮（100℃、30min）熱處理。蒸瓶的目的是使得瓶內(nèi)的灰塵、沙礫等雜質(zhì)經(jīng)加熱浸泡后落入水中，容易洗滌干凈，同時也是一種化學(xué)處理，讓玻璃表面的硅酸鹽水解，微量的游離堿和金屬鹽溶解，使安瓿的化學(xué)穩(wěn)定性提高。目前國內(nèi)藥廠使用的安瓿洗滌設(shè)備有下列幾種：

1．噴淋式安瓿洗滌機組 這種機組由噴淋機、甩水機、蒸煮箱、水過濾器及水泵等機件組成。噴淋機主要由傳送帶、淋水板及水循環(huán)系統(tǒng)組成。這種生產(chǎn)方式的生產(chǎn)效率高，設(shè)備簡單，曾被廣泛采用。但這種方式存在占地面積大、耗水量多、而且洗滌效果欠佳等缺點。

2．氣水噴射式安瓿洗滌機組 這種機組適用于大規(guī)格安瓿和曲頸安瓿的洗滌，是目前水針劑生產(chǎn)上常用的洗滌方法。氣水噴射式洗滌機組主要由供水系統(tǒng)、壓縮空氣及其過濾系統(tǒng)、洗瓶機等三大部分組成。洗滌時，利用潔凈的洗滌水及經(jīng)過過濾的壓縮空氣，通過噴嘴交替噴射安瓿內(nèi)外部，將安瓿洗凈。整個機組的關(guān)鍵設(shè)備是洗瓶機，而關(guān)鍵技術(shù)是洗滌水和空氣的過濾，以保證洗瓶符合要求。

3．超聲波安瓿洗滌機組 利用超聲技術(shù)清洗安瓿是國外制藥工業(yè)近二十年來新發(fā)展起來的一項新技術(shù)。在液體中傳播的超聲波能對物體表面的污物進行清洗。它具有清洗潔凈度高、清洗速度快等特點。特別是對盲孔和各種幾何狀物體，洗凈效果獨特。

（六）安瓿的干燥與滅菌

安瓿洗滌后，一般置于120～140℃烘箱內(nèi)干燥。需無菌操作或低溫滅菌的安瓿在180℃干熱滅菌1.5h。

三、注射劑的配制與過濾

（一）注射劑的配制

1．原輔料的準備 供注射用的原輔料，必須符合《中國藥典》2010年版所規(guī)定的各項雜質(zhì)檢查與含量限度。某些品種，可另行制定內(nèi)控標(biāo)準。在大生產(chǎn)前，應(yīng)做小樣試制，檢驗合格方可使用。對有時不易獲得專供注射用的原料，但醫(yī)療上又確實需要，必須用化學(xué)試劑時，應(yīng)嚴格控制質(zhì)量，加強檢驗，特別是水溶性鋇、砷、汞等有毒物質(zhì)，還應(yīng)進行安全試驗，證明無害并經(jīng)有關(guān)部門批準后方可使用。

配制前，應(yīng)正確計算原料的用量，稱量時應(yīng)兩人核對。若在制備過程中（如滅菌后）藥物含量易下降，應(yīng)酌情增加投料量。含結(jié)晶水藥物應(yīng)注意其換算。投料量可按下式計算：

成品標(biāo)示量百分數(shù)通常為100%，有些產(chǎn)品因滅菌或貯藏期間含量會有所下降，可適當(dāng)增加投料量（即提高成品標(biāo)示量的百分數(shù)）。原料（附加劑）用量=實際配液量×成品含量%。實際配液量=實際灌注量+實際灌注時損耗量。

2．注射液的配制

（1）配制用具的選擇與處理 常用裝有攪拌器的夾層鍋配液，以便加熱或冷卻。配制用具的材料有：玻璃、耐酸堿搪瓷、不銹鋼、聚乙烯等。配制濃的鹽溶液不宜選用不銹鋼容器；需加熱的藥液不宜選用塑料容器。配制用具用前要用硫酸清潔液或其他洗滌劑洗凈，并用新鮮注射用水蕩洗或滅菌后備用。操作完畢后立即刷洗干凈。

（2）配制方法 分為濃配法和稀配法兩種。將全部藥物加入部分溶劑中配成濃溶液，加熱或冷藏后過濾，然后稀釋至所需濃度，此謂濃配法，此法可濾除溶解度小的雜質(zhì)。將全部藥物加入所需溶劑中，一次配成所需濃度，再行過濾，此謂稀配法，可用于優(yōu)質(zhì)原料。

（3）注意事項 配制注射液時應(yīng)在潔凈的環(huán)境中進行，一般不要求無菌，但所用器具及原料和附加劑盡可能無菌，以減少污染；配制劇毒藥品注射液時，嚴格稱量與校核，并謹防交叉污染；對不穩(wěn)定的藥物更應(yīng)注意調(diào)配順序（先加穩(wěn)定劑或通惰性氣體等），有時要控制溫度與避光操作；對于不易濾清的藥液可加0.1%～0.3%活性炭處理，小量注射液可用紙漿混炭處理。活性炭常選用一級針用炭或767型針用炭，可確保注射液質(zhì)量。使用活性炭時還應(yīng)注意其對藥物（如生物堿鹽等）的吸附作用，要通過加炭前后藥物含量的變化，確定能否使用。活性炭在酸性溶液中吸附作用較強，故活性炭最好用酸堿處理并活化后使用。

配制油性注射液，常將注射用油先經(jīng)150℃干熱滅菌1～2h，冷卻至適宜溫度（一般在主藥熔點以下20～30℃，趁熱配制、過濾（一般在60℃以下），溫度不宜過低，否則黏度增大，不易過濾。溶液應(yīng)進行半成品質(zhì)量檢查（如pH值、含量等），合格后方可過濾。

（二）注射液的過濾

1．濾過機理 根據(jù)固體粒子被截留的方式不同，濾過機理分為如下三種。

（1）過篩作用 起過篩作用的介質(zhì)有微孔濾膜、超濾膜和反滲透膜等。

（2）深層截留 分離過程發(fā)生在過濾介質(zhì)的“內(nèi)部”，粒徑小于濾過介質(zhì)孔徑的固體粒子在濾過過程中，進入介質(zhì)的深層而被截留分離。可能是由于慣性、重力、擴散等作用而沉積在空隙內(nèi)部搭接形成所謂“架橋”或濾渣層，也可能由于靜電力或范德華力而被吸附于孔隙內(nèi)部。如砂濾棒、垂熔玻璃漏斗、多孔陶瓷、石棉濾過板等屬于此種濾過機理。

（3）濾餅濾過 固體粒子聚集在濾過介質(zhì)表面，由于濾過介質(zhì)的架橋作用，濾過開始時在濾過介質(zhì)上形成初始濾餅層，在繼續(xù)過濾過程中，逐漸增厚的濾餅層起攔截顆粒的作用。

2．濾過的影響因素 過篩作用和深層截留的濾過速度與阻力主要由濾過介質(zhì)所控制，如果藥液中固體粒子含量少于0.1%時，屬于介質(zhì)過濾；如注射液的濾過，除菌濾過等。若藥液中固體含量大于1%時，屬于濾餅濾過；如浸出液的濾過等，濾過的速度和阻力主要受濾餅的影響，一般來說，濾餅濾過具有較大的阻力，液體由間隙濾過。

假定過濾時液體流過致密濾渣層的間歇，且間歇為均勻的毛細管聚束，則液體的流動遵循Poiseuile公式：

式中：V——液體的濾過體積；

P——濾過時的操作壓力（或濾床面上下壓差）；

r——流過層中毛細管半徑；

l——毛細管長度；

η——濾液黏度；

t——濾過時間。

由式（3-12）可以看出濾過的影響因素為：①操作壓力越大則濾速越快，因此常采用加壓或減壓濾過法。②濾液黏度越大，則過濾速度越慢。而液體的黏度隨溫度的升高而降低，因此常采用趁熱濾過。③濾材中毛細管半徑對濾過的影響很大，毛細管越細，阻力增大，不易濾過。為了提高濾過效率，可選用助濾劑。助濾劑是具有多孔性、不可壓縮性的濾過介質(zhì)，阻止沉淀物接觸和堵塞濾過介質(zhì)孔眼，保持一定空隙率，減少阻力，從而起到助濾的作用。常用的助濾劑有：紙漿、硅藻土、滑石粉、活性炭等。④濾速與毛細管長度成反比，故沉積濾餅的量越多，則阻力增大，濾速越慢，常采用預(yù)濾。

上述影響因素同樣適用于表面過篩及深層截留。

3．濾器種類與特點 濾器按其截留能力可歸類為粗濾（預(yù)濾）及精濾（末端濾過）。粗濾濾器包括砂濾棒、板框式壓濾器、鈦濾器；精濾濾器包括垂熔玻璃濾器、微孔濾膜、超濾膜等。

（1）普通漏斗 常用的有玻璃漏斗和布氏漏斗，常用濾紙、長纖維的脫脂棉以及絹布等做過濾介質(zhì)，適用于少量液體制劑的預(yù)濾，如脫碳過濾等。

（2）垂熔玻璃濾器 分為垂熔玻璃漏斗、濾器及濾棒三種。按過濾介質(zhì)的孔徑分為1～6號，生產(chǎn)廠家不同，代號亦有差異。國內(nèi)生產(chǎn)的垂熔玻璃濾器規(guī)格見表3-4。其中3號和G2號多用于常壓過濾，4號和G3號多用于減壓或加壓過濾，6號以及G5、G6號作無菌過濾用。

垂熔玻璃濾器的優(yōu)點是化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定（強堿和氫氟酸除外）；吸附性低，一般不影響藥液的pH；易洗凈，不易出現(xiàn)裂漏，碎屑脫落等現(xiàn)象。缺點是價格高，脆而易破。使用時可在垂熔漏斗內(nèi)墊上一稠布或濾紙，可防污物堵塞濾孔，也有利于清洗，。可提高濾液的質(zhì)量。這種濾器，操作壓力不得超過98.06kPa（1kg/cm。），可熱壓滅菌。垂熔漏斗使用后要用水抽洗，并以1%～2%硝酸鈉硫酸液浸泡處理。

（3）砂濾棒 國產(chǎn)的主要有兩種，一種是硅藻土濾棒，另一種是多孔素瓷濾棒。硅藻土濾棒質(zhì)地疏松，一般適用于黏度高、濃度大的藥液。根據(jù)自然濾速分為粗號（500mL/min以上）、中號（500～300mL/min）、細號（300mL/min以下）。注射劑生產(chǎn)常用中號。多孔素瓷濾棒質(zhì)地致密，濾速比硅藻土濾棒慢，適用于低黏度的藥液。

砂濾棒價廉易得，濾速快，適用于大生產(chǎn)中粗濾。但砂濾棒易于脫砂，對藥液吸附性強，難清洗，且有改變藥液pH現(xiàn)象，濾器吸留濾液多。

（4）板框式壓濾機 由多個中空濾框和實心濾板交替排列在支架上組成，是一種在加壓下間歇操作的過濾設(shè)備。此種濾器的過濾面積大，截留的固體量多，且可在各種壓力下過濾。可用于黏性大、濾餅可壓縮的各種物料的過濾，特別適用于含少量微粒的待濾液。在注射劑生產(chǎn)中，多用于預(yù)濾。缺點是裝配和清洗麻煩，容易滴漏。

（5）鈦濾器 是用粉末冶金工藝將鈦粉末加工制成，有鈦濾棒與鈦濾片。注射劑配制中的脫炭濾過，可以使用T2300 G-30的鈦濾棒，其氣泡點試驗最大孔徑大于30μm，而注射液的除微粒預(yù)濾過則可選用T2300 G-60的鈦濾片，該片氣泡點試驗最大孔徑不大于60μm，厚度1.0mm，直徑145mm，鈦濾器在注射劑生產(chǎn)中是一種較好的預(yù)濾材料。鈦濾器具有抗熱，抗震性能好、強度大、重量輕、不易破碎，過濾阻力小，濾速大等優(yōu)點。

（6）微孔濾膜過濾器 以微孔濾膜作過濾介質(zhì)的過濾裝置稱為微孔濾膜過濾器。常用的有圓盤形和圓筒形兩種，圓筒形內(nèi)有微孔濾膜過濾器若干個，過濾面積大，適用于注射劑的大生產(chǎn)。微孔濾膜過濾器的優(yōu)點：微孔孔徑小，截留能力強，有利于提高注射劑的澄明度；孔徑大小均勻，即使加快速度，加大壓力差也不易出現(xiàn)微粒“泄漏”現(xiàn)象；在過濾面積相同、截留顆粒大小相同的情況下，微孔濾膜的濾速比其他濾器（垂熔玻璃漏斗、砂濾棒）快約40倍；濾膜無介質(zhì)的遷移，不會影響藥液的pH，不滯留藥液；濾膜用后棄去，不會造成產(chǎn)品之間的交叉感染。缺點：易堵塞，有些濾膜化學(xué)性質(zhì)不理想。

濾膜的理化性質(zhì)：①熱穩(wěn)定性，纖維素混合酯濾膜在干熱125℃以下的空氣中穩(wěn)定，故在121℃熱壓滅菌不受影響。聚四氟乙烯膜在260℃的高溫下穩(wěn)定；②化學(xué)性能，纖維素酯膜適用于藥物的水溶液、稀酸和稀堿、脂肪族和芳香族碳氫化合物或非極性液體。不適用于酮類、酯類、乙醚-乙醇混合溶液以及強酸強堿。尼龍膜或聚四氟乙烯膜化學(xué)穩(wěn)定性好，特別是聚四氟乙烯膜，對強酸強堿和有機溶劑均穩(wěn)定。

除此之外，還有超濾裝置、多孔聚乙烯燒結(jié)管過濾器等。

在注射劑生產(chǎn)中，一般采用二級過濾，先將藥液用常規(guī)的濾器如砂濾棒、垂熔玻璃漏斗、板框壓濾器或加預(yù)濾膜等辦法進行預(yù)濾后才能使用濾膜過濾，即可將膜濾器串聯(lián)在常規(guī)濾器后作末端過濾之用。但一般還不能達到除菌的目的，過濾后還需滅菌。

4．濾過裝置

（1）高位靜壓濾過裝置 此種裝置適用于生產(chǎn)量不大、缺乏加壓或減壓設(shè)備的情況，特別在有樓房時，藥液在樓上配制，通過管道濾過到樓下進行灌封。此法壓力穩(wěn)定，質(zhì)量好，但濾速慢。

（2）減壓濾過裝置 此法適應(yīng)于各種濾器，設(shè)備要求簡單，但壓力不夠穩(wěn)定，操作不當(dāng)，易使濾層松動，影響質(zhì)量。一般可采用如圖3-17所示的濾過裝置，先經(jīng)濾棒和垂熔玻璃濾球預(yù)濾，再經(jīng)膜濾器精濾，此裝置可以進行連續(xù)濾過，整個系統(tǒng)都處在密閉狀態(tài)，藥液不易污染。但進入系統(tǒng)中的空氣必須經(jīng)過濾過。

（3）加壓濾過裝置 加壓濾過多用于藥廠大量生產(chǎn)，壓力穩(wěn)定、濾速快、質(zhì)量好、產(chǎn)量高。由于全部裝置保持正壓，如果濾過時中途停頓，對濾層影響也較小，同時外界空氣不易漏入濾過系統(tǒng)。但此法需要離心泵和壓濾器等耐壓設(shè)備，適于配液、濾過及灌封工序在同一平面的情況。無菌濾過宜采用此法，有利于防止污染：加壓濾過裝置如圖3-18所示。也可改用耐壓的密閉配液缸，在配液缸上用氮氣或壓縮空氣加壓濾過，這種情況則不需要離心泵，從而避免了泵對藥液的污染。

四、注射劑的灌封

濾液經(jīng)檢查合格后進行灌封，灌封包括灌注藥液和封口兩步，灌封應(yīng)在同一室內(nèi)進行。灌注后立即封口，以免污染。灌封室是滅菌制劑制備的關(guān)鍵地區(qū)，其環(huán)境要嚴格控制，潔凈度達到100級。封口有拉封與頂封兩種，拉封對藥液的影響小。如注射用水加甲紅試液測pH值為6.45，灌裝于10mL安瓿中，分別用拉封與頂封，再測pH值時，拉封為pH6.35，頂封則為pH5.90。故目前都主張拉封，粉針用安瓿亦采用拉封。

灌封操作分為手工灌封和機械灌封兩種。手工灌封常用于小試，藥廠多采用全自動灌封機。安瓿自動灌封機因封口方式不同而異，但它們灌注藥液均由下列動作協(xié)調(diào)進行：安瓿傳送至軌道，灌注針頭降入安瓿輸注藥液，灌注針頭上升、安瓿傳送至封口處。灌液部分裝有自動止灌裝置，當(dāng)灌注針頭降下而無安瓿時，藥液不再輸出以免污染機器與浪費。灌注藥液并充氣后的安瓿立即由封口部分封口，再經(jīng)軌道送出產(chǎn)品。我國已有洗、灌、封聯(lián)動機和割、洗、灌、封聯(lián)動機，生產(chǎn)效率有很大提高。但滅菌包裝還沒有聯(lián)動化。

灌裝藥液時應(yīng)注意以下幾點：①劑量準確，灌裝時可按《中國藥典》附錄要求適當(dāng)增加藥液量，以保證注射用量不少于標(biāo)示量。根據(jù)藥液的黏稠程度不同，在灌裝前，必須用精確的小量筒校正注射器的吸液量，試裝若干支安瓿，經(jīng)檢查合格后再行灌裝。②藥液不沾瓶，為防止灌注器針頭“掛水”，活塞中心常有毛細孔，可使針頭掛的水滴縮回并調(diào)節(jié)灌裝速度，過快時藥液易濺至瓶壁而沾瓶。③通惰性氣體時既不使藥液濺至瓶頸，又使安瓿空間空氣除盡。一般采用空安瓿先充惰性氣體，灌裝藥液后再充一次效果較好。

在安瓿灌封過程中可能出現(xiàn)的問題有：劑量不準，封口不嚴（毛細孔）、出現(xiàn)大頭、焦頭、癟頭、爆頭等，應(yīng)分析原因及時解決。焦頭主要因安瓿頸部沾有藥液，封口時炭化而致。灌藥室給藥太急，濺起藥液在安瓿瓶壁上；針頭往安瓿里灌藥時不能立即回縮或針頭安裝不正；壓藥與打藥行程不配合等都會導(dǎo)致焦頭的產(chǎn)生。充CO2時容易發(fā)生癟頭、爆頭。對于出現(xiàn)的問題，應(yīng)逐一分析原因，然后予以解決。

五、注射劑的滅菌與檢漏

（一）滅菌

凡耐熱的產(chǎn)品，宜采用115℃30min滅菌。對熱不穩(wěn)定及在避菌條件較好的情況下生產(chǎn)的注射劑，一般1～5mL安瓿可用流通蒸氣滅菌100℃30min,10～20mL安瓿使用100℃45min滅菌。滅菌效果以F0值大于8進行驗證。注射劑從配制到滅菌，必須在規(guī)定時間內(nèi)完成（一般12h）。

滅菌效果與滅菌溫度及時間有關(guān)。然而溫度高滅菌時間長，易于殺死微生物，但卻不利于藥液的穩(wěn)定性。因此在選擇滅菌方法時，必須注意各方面因素，根據(jù)具體品種的性質(zhì)，選擇不同的滅菌方法和時間。

（二）檢漏

安瓿如果有毛細孔或微小的裂縫存在，則微生物或污物可以進入安瓿，影響注射劑質(zhì)量及使用安全性，因此，滅菌后的注射劑需進行檢漏。

檢漏一般應(yīng)用滅菌檢漏兩用滅菌器。滅菌完畢后，稍開鍋門，從進水管放進冷水淋洗安瓿使溫度降低；然后關(guān)緊鍋門并抽氣，滅菌器內(nèi)壓力逐漸降低，如有漏氣安瓿，則安瓿內(nèi)空氣也被抽出，當(dāng)真空度達到85.3～90.6kPa（640～680mmHg）后，停止抽氣；開色水閥，將有色水吸入滅菌鍋中至蓋過安瓿，然后關(guān)閉色水閥，開放氣閥，再將有色水抽回貯器中；開啟鍋門，將注射劑車架推出，淋洗后檢查，剔去帶色的漏氣安瓿。也可在滅菌后，趁熱立即于滅菌鍋內(nèi)放入有色水，安瓿遇冷內(nèi)部氣體收縮，壓力下降，有色水即從漏氣的毛細孔或裂縫進入而被檢出。此外還可將安瓿倒置或橫放于滅菌器內(nèi)，滅菌與檢漏同時進行或用儀器檢查安瓿裂縫。

六、注射劑的質(zhì)量檢查

注射劑質(zhì)量直接影響其藥效和用藥的安全性。《中國藥典》2010版中主要規(guī)定了澄明度、微生物、熱原，穩(wěn)定性等項目的檢查。

（一）澄明度

注射液中特別是輸液中微粒污染可造成循環(huán)障礙引起血管栓塞，微粒過多可造成血管堵塞，產(chǎn)生靜脈炎或由于巨噬細胞的吞噬，引起組織肉芽腫。澄明度檢查，不但可以保證用藥安全，而且可以發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)中的問題。例如，白點多為原料藥或安瓿產(chǎn)生；纖維多半因環(huán)境污染所致。

澄明度檢查：取供試品，在黑色背景、20W照明熒光燈光源下，用目檢視，應(yīng)符合國家食品藥品監(jiān)督管理局《澄明度檢查細則和判斷標(biāo)準》的規(guī)定，除特殊品種外，均不得有異物。

（二）熱原

常用的熱原檢查方法由家兔法和細菌內(nèi)毒素檢查法。

1．家兔法 《中國藥典》2010年版規(guī)定的熱原檢查法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)，在規(guī)定時間內(nèi)，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。供試驗用家兔應(yīng)按藥典要求進行挑選，以免影響試驗結(jié)果。

家兔法作為熱原檢查法，仍為各國藥典法定的方法。選用家兔作試驗動物，是因為家兔對熱原的反應(yīng)和人基本相似。檢查要得到一致結(jié)果的關(guān)鍵是動物狀況、試驗室條件和操作。為此，目前已采用直腸熱電偶代替直腸溫度計，熱電偶在整個實驗中固定在直腸內(nèi)，其溫度可在儀表中顯示出來，可免除肛表多次插入的測量操作。

2．細菌內(nèi)毒素檢查法 系利用鱟試劑與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機理，以判斷供試品中細菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素單位（EU）表示。《中國藥典》2010年版規(guī)定：細菌內(nèi)毒素檢查包括兩種方法，即凝膠法和光度檢查法，后者包括濁度法和顯色基質(zhì)法。供試品檢測時，可使用其中任何一種方法進行試驗。當(dāng)測定結(jié)果有爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠法結(jié)果為準。

鱟試劑是用鱟的血細胞溶解物制得，其與細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機制是：鱟的血細胞中含兩種物質(zhì)，即凝固蛋白原和凝固酶原。凝固酶原經(jīng)內(nèi)毒素激活，轉(zhuǎn)化成具有活性的凝固酶；凝固酶使凝固蛋白原酶解，轉(zhuǎn)變成凝固蛋白；凝固蛋白又在交聯(lián)酶的作用下，相互凝集而形成牢固的凝膠如圖3-19所示。

比較家兔法與鱟試驗法的靈敏性的試驗，結(jié)果說明鱟試驗法能檢出0.0001μg/mL的內(nèi)毒素，而家兔法只能檢出0.001μg/mL的內(nèi)毒素，故認為鱟試驗法比家兔法靈敏度大十倍。鱟試驗法特別適用于某些不能用家兔進行熱原檢測的品種，如放射性藥劑、腫瘤抑制劑等。因為這些制劑具有細胞毒性，具有一定的生物效應(yīng)，不適宜用家兔法檢測。國內(nèi)用此法檢查輸液劑、放射性藥劑的熱原。目前一般認為由于鱟試驗法實驗操作簡單，實驗費用少，結(jié)果迅速可靠。因而特別適用于生產(chǎn)過程中的熱原控制。但其對革蘭陰性菌以外的內(nèi)毒素不夠靈敏，故尚不能代替家兔熱原檢查法。

（三）無菌度

注射劑在滅菌結(jié)束后，除在滅菌過程中對有關(guān)參數(shù)進行控制外都必須抽出一定數(shù)量的樣品進行無菌試驗，以確保產(chǎn)品的滅菌質(zhì)量。通過無菌操作制備的成品更應(yīng)注意無菌檢查的結(jié)果。具體檢查方法參看《中國藥典》2010年版。

（四）穩(wěn)定性評價

注射劑的穩(wěn)定性除上述無菌檢查進行生物學(xué)穩(wěn)定性評價外，還需要根據(jù)藥物的性質(zhì)及注射液的類型進行物理及化學(xué)穩(wěn)定性進行評價。溶液型的注射液主要是化學(xué)穩(wěn)定性的問題，因此需要制定主要成分含量測定方法來評價其化學(xué)穩(wěn)定性。混懸型及乳劑型注射液，除化學(xué)穩(wěn)定性外，還有物理穩(wěn)定性的問題，包括在滅菌及貯存過程中，是否發(fā)生晶型轉(zhuǎn)變、結(jié)晶長大，振搖后是否容易分散均勻。乳劑型注射液則主要是評價滅菌及貯存過程中乳滴是否變大。這些穩(wěn)定性的變化直接影響產(chǎn)品的有效性及安全性。

此外藥典還規(guī)定了注射劑的裝量檢查。而鑒別、含量測定、pH值的測定、毒性試驗、刺激性試驗等按具體品種要求進行檢查。

七、注射劑的印字與包裝

印字的內(nèi)容包括注射劑的名稱、規(guī)格及批號。包裝對保證注射劑在貯存期的穩(wěn)定性具有重要意義，如避光及防破損。一般用內(nèi)襯瓦楞紙的紙盒分隔成行盛裝。塑料包裝是近年來發(fā)展起來的一種新型包裝形式，安瓿塑料包裝一般有熱塑包裝和發(fā)泡包裝。

目前不少生產(chǎn)單位已使用印字、裝盒、貼簽及包裝等聯(lián)成一體的印包裝聯(lián)動機，大大提高了安瓿的印包效率。