案例11　異常高TG檢測(cè)假性低值分析

一、案例說明

檢驗(yàn)科檢測(cè)一例樣本時(shí)，檢測(cè)結(jié)果有吸光度異常的報(bào)警。該樣本在分檢時(shí)已標(biāo)注嚴(yán)重脂血，可TG結(jié)果為3.75mmol/L，與標(biāo)本狀態(tài)嚴(yán)重不符。查看TG的反應(yīng)曲線，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)的OD值迅速升到頂部后便開始下降，到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)，OD值僅為峰值的六分之一，檢測(cè)結(jié)果明顯假性偏低（圖2-5）。

該樣本用手工稀釋后，測(cè)定結(jié)果為67.2mmol/L，遠(yuǎn)超TG的線性20mmol/L，反應(yīng)曲線正常，立即發(fā)送報(bào)告給臨床。筆者同時(shí)使用檢測(cè)系統(tǒng)B檢測(cè)，結(jié)果雖有所改善，但也存在著同一現(xiàn)象。

二、案例分析

臨床生化檢測(cè)TG時(shí)常用終點(diǎn)法，實(shí)驗(yàn)反應(yīng)到后期，所有待測(cè)物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物時(shí)，吸光度不再上升或下降。終點(diǎn)法的特點(diǎn)一般是當(dāng)反應(yīng)物濃度過高時(shí)，結(jié)果會(huì)保持在該實(shí)驗(yàn)的線性上限。目前臨床檢測(cè)TG的試劑上限一般在20mmol/L左右，所以該樣本的TG初測(cè)結(jié)果理論上應(yīng)不低于20mmol/L，這與第一次測(cè)得的結(jié)果也不符。查看TG的試劑說明書發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)廠家都是氧化酶法，顯色反應(yīng)均為Trinder反應(yīng)，考慮檢測(cè)樣本的TG濃度極高，反應(yīng)速度快，使參與反應(yīng)的氧迅速耗盡，而空氣中的氧未能及時(shí)溶解于反應(yīng)液中，導(dǎo)致反應(yīng)停滯甚至可能發(fā)生逆反應(yīng)，進(jìn)而造成錯(cuò)誤的結(jié)果，并且以假性低值多見。筆者采用手工檢測(cè)，可以更直觀地呈現(xiàn)這種現(xiàn)象。在小口徑的反應(yīng)杯中，當(dāng)試劑與樣本充分混勻反應(yīng)一段時(shí)間后，反應(yīng)液會(huì)出現(xiàn)分層，上層顏色較深，下層較淺，這是氧未能及時(shí)進(jìn)入反應(yīng)液下層所導(dǎo)致的。

三、評(píng)價(jià)

隨著現(xiàn)代人們生活方式的調(diào)整以及飲食結(jié)構(gòu)的改變，體力勞動(dòng)不斷減少而高熱量高脂肪食物的過多攝入，使越來(lái)越多的人成了高脂血癥患者。在實(shí)際臨床檢驗(yàn)過程中，此類脂濁標(biāo)本時(shí)有發(fā)生，我們應(yīng)該怎樣避免這樣的假陰性結(jié)果呢？除了加強(qiáng)檢驗(yàn)人員對(duì)異常反應(yīng)曲線的識(shí)別能力外，還可通過反應(yīng)曲線監(jiān)測(cè)到吸光度異常觸發(fā)報(bào)警，從而關(guān)聯(lián)自動(dòng)稀釋重測(cè)功能，得出準(zhǔn)確結(jié)果。

在臨床檢驗(yàn)過程中，特殊疾病樣本檢測(cè)超出生化試劑檢測(cè)線性范圍，反應(yīng)曲線異常的情況越來(lái)越多見。如果檢驗(yàn)人員未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常情況，該“正常”報(bào)告有可能就被誤發(fā)；即便提前發(fā)現(xiàn)反應(yīng)曲線異常，頻繁的復(fù)查工作也會(huì)影響工作效率；而對(duì)于才從事檢驗(yàn)工作的人員，異常曲線識(shí)別能力尚待加強(qiáng)。我們?cè)跈z測(cè)系統(tǒng)A的反應(yīng)曲線檢查參數(shù)設(shè)置界面時(shí)（圖2-6），提供了4個(gè)可設(shè)置條件，可以針對(duì)不同項(xiàng)目、不同異常情況，進(jìn)行靈活多樣的過程數(shù)據(jù)檢查和判斷設(shè)置。其中P1和P2是指反應(yīng)曲線上測(cè)光點(diǎn)順序編號(hào)，軟件自動(dòng)計(jì)算P2-P1的值；M和N是指判斷閾值的下限和上限，P2-P1的值與設(shè)定的判斷閾值比較，判斷反應(yīng)過程數(shù)據(jù)是否存在異常。當(dāng)該曲線出現(xiàn)異常，儀器通過應(yīng)用反應(yīng)曲線檢查參數(shù)和算法功能，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)識(shí)別并判斷異常曲線，給出“RE”結(jié)果標(biāo)識(shí)，通過自動(dòng)稀釋重測(cè)后，反應(yīng)曲線正常，得出正確的測(cè)試結(jié)果68.43mmol/L（圖2-7），與手工稀釋后檢測(cè)的結(jié)果一致。

具有測(cè)量程序的配套系統(tǒng)，通過系統(tǒng)化的參數(shù)設(shè)置（如波長(zhǎng)、反應(yīng)時(shí)間、樣本量等），在臨床應(yīng)用過程中，可對(duì)底物耗盡、Trinder反應(yīng)、前帶效應(yīng)等檢測(cè)異常進(jìn)行預(yù)判及調(diào)整，提高檢測(cè)效率，縮短TAT時(shí)間，同時(shí)減少潛在的出錯(cuò)風(fēng)險(xiǎn)，提高臨床及患者滿意度。脂血是生化檢測(cè)最常見的干擾，干擾的強(qiáng)弱和項(xiàng)目所用的波長(zhǎng)、方法學(xué)、樣本與試劑的比例、脂血的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

值得一提的是，如果標(biāo)本已經(jīng)出現(xiàn)了嚴(yán)重的脂血，需要解決的不僅僅是TG一個(gè)項(xiàng)目，通過系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)置也只是解決部分項(xiàng)目的干擾，更多的項(xiàng)目是沒有辦法避免的，這時(shí)候需要選擇更有效地去除脂血的干擾。消除脂血干擾的方法主要有沉淀法、有機(jī)溶劑提取法、高速離心法和鹽水稀釋法等，這些方法都是根據(jù)脂血標(biāo)本的不同特性設(shè)計(jì)的，存在各自的優(yōu)缺點(diǎn)。脂蛋白脂肪酶（lipoprteinlipase，LPL）是參與體內(nèi)脂質(zhì)和脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶。主要催化血清CM和VLDL中的TG分解，生成脂肪酸和甘油兩種代謝產(chǎn)物。崔曉蕾等人利用添加LPL的方法對(duì)高脂血標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在不影響TG檢測(cè)的前提下，能排除高脂血對(duì)TG、AST、ALT、TP、TBIL、LDH、CK-MB檢測(cè)的干擾。從使用酶法測(cè)定TG的檢測(cè)原理分析，因?yàn)長(zhǎng)PL分解TG后生成甘油，并不影響TG指標(biāo)的后續(xù)反應(yīng)及測(cè)定TG的分解產(chǎn)物。因此應(yīng)用LPL方法處理標(biāo)本，并不會(huì)影響標(biāo)本中TG指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果，此點(diǎn)優(yōu)于其他脂血處理方法。但是血清標(biāo)本成分十分復(fù)雜，LPL處理方法對(duì)更多生化指標(biāo)的影響需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

（蔣曉軍　編，

劉振杰　黃憲章　審）