1.3 化學發光免疫分析技術

化學發光免疫分析法（Chemiluminescence Immunoassay, CLIA）與化學發光酶免疫分析法（CLEIA）及生物發光免疫分析法（BLIA）均屬于發光免疫分析（Luminescence Immunoassay, LIA）。

化學發光是指在化學反應過程中產生光的發射現象，化學發光免疫分析法就是將化學發光與抗原抗體結合的免疫反應相結合而建立的一種免疫分析技術。該方法彌補了放射免疫技術放射性污染的不足，具備化學發光的高靈敏性和免疫反應的高特異性雙重優點。

目前常用的化學發光劑包括吖啶鹽類化合物（如N-N-二甲基吖啶硝酸鹽）、酰肼類（如魯米諾）、咪唑類化合物（如2,4,5-三苯基咪唑類化合物）等。

利用CLIA法檢測抗原或抗體，首先需要用化學發光劑標記抗體或抗原，然后加入待測樣品中與相應的抗原或抗體結合，將結合態的化學發光標記物（抗原抗體復合物沉淀）與游離態化學發光標記物分離，隨后加入發光促進劑激發發光反應，利用化學發光免疫分析儀對光強度進行檢測，即可測得待測抗原或抗體的濃度。

因該方法的實驗原理及步驟與酶免疫分析技術非常相似，因此具體的實驗步驟此處不再詳細介紹。

知識窗

化學發光法在臨床醫學中的拓展應用實例

有科學家將化學發光免疫檢測技術與磁珠顆粒（Magnetic Particles, MPs）相結合，開發出一種能夠幫助膀胱癌（Bladder Cancer, BC）和腎細胞癌（Renal Cell Carcinoma, RCC）患者測定尿液中的Survivin（存活素蛋白）的高靈敏度方法（原理如圖1-8所示），將可能為BC及RCC的臨床診斷及治療提供非常有利的幫助（見參考文獻）。

圖1-8 化學發光免疫檢測技術與磁珠顆粒結合檢測Survivin蛋白（本圖彩印版見后附）

圖中C6和E6為識別Survivin不同抗原表位的單克隆抗體。通過抗原抗體的特異性識別結合、磁珠在磁場環境下對抗原Survivin的富集，以及對化學發光物質的光強度測定，從而可以對一份生物樣品中微量存在的Survivin進行定量分析。