2.4　實驗技術

2.4.1　樣品的制備

紫外-可見吸收光譜的測定通常在溶液中進行，固體樣品需處理成溶液。光譜分析法對溶液的要求：良好的溶解能力，揮發性小，毒性低等。在溶劑的選擇上，首先，要考慮溶劑在紫外區產生一定的吸收而對測定結果的影響；其次，溶劑的極性不同不僅影響譜帶的位置（發生紅移或藍移）或譜帶強度，而且會影響譜帶精細結構的出現或消失。

2.4.2　測定條件的選擇

2.4.2.1　波長的選擇

為了使測定結果有較高的靈敏度和準確度，通常選擇最大吸收波長作為分析波長。依據吸收曲線確定最大吸收波長，在最大吸收波長處進行定量分析，其測定的靈敏度較高，吸光度隨波長的變化較小，可以獲得較好的測量精度。

2.4.2.2　狹縫寬度的選擇

考慮到最小干擾的原則，定性分析常采用最小狹縫寬度。定量分析時，如果狹縫寬度太小則入射光強度太弱會引起信噪比降低，因此狹縫寬度應適當增大。

2.4.2.3　吸光度范圍

吸光度在0.2～0.7時，測量的準確度較高。因此應該調整溶液吸光度大小，控制在此范圍內。常用的方法是：①含量高時少取樣或取稀液，而含量低時可多取樣或萃取富集；②若溶液已顯色，則可通過改變吸收池的厚度調吸光度大小；③選擇合適的參比溶液。

2.4.2.4　有色化合物的形成

在實際測定中，樣品中的被測組分不產生吸收，則需要加入一種試劑（顯色劑），顯色劑與被測組分作用形成有色化合物或形成含有生色團的化合物。該顯色劑應具有選擇性好，靈敏度高，所形成的有色化合物的組成恒定，化學性質穩定等特點。常用的顯色劑多為含有生色團的有機化合物。

2.4.3　參比溶液的選擇

調節儀器的工作零點常采用參比溶液。測定時，讓光通過參比溶液，調節零點，使A=0，T=100%，然后測試待測溶液。

選擇適當的參比溶液，可以消除某些干擾因素。參比溶液選擇的原則是使所測A值能真正反映待測樣品的濃度。參比溶液選擇的具體方法：

①當試液、顯色劑和條件試劑（如pH緩沖溶液、掩蔽劑等）均無色時，用蒸餾水作參比溶液。

②若顯色劑、條件試劑無色，而試液中其他共存離子有色，則用不加顯色劑和條件試劑的試液作參比溶液，可消除共存離子的顏色干擾。

③若顯色劑、條件試劑及被測試樣中的共存離子在測定波長下均有吸收，可取一份試液加入掩蔽劑，將被測組分掩蔽起來，再加入顯色劑、條件試劑，將此混合液作參比溶液，以消除干擾。

此外，為得到準確的測定結果，對吸收池厚度、透射率、儀器波長、讀數刻度等也應進行校正。