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1.2 儀器結構與原理

紫外-可見分光光度計由光源、單色器、樣品池、檢測器以及記錄和信號顯示系統五部分組成。按其光學系統可分為單光束和雙光束分光光度計、單波長和雙波長分光光度計。

1.2.1 按光學系統分類

(1)單光束分光光度計

單光束分光光度計是紫外-可見分光光度計的經典結構。經單色器分光后的一束平行光輪流通過參比溶液和樣品溶液,進行吸光度的測定。它結構簡單,操作方便,容易維修,適用于常規分析。

(2)雙光束分光光度計

光源發出的連續輻射經單色器分光后經反射器分解為強度相等的兩束光,一束通過參比池,另一束通過樣品池。它能自動比較兩束光的強度,比值即為試樣的透射比,經對數變換后轉換成吸光度,并作為波長的函數記錄下來。雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。因兩束光同時分別通過參比池和樣品池,還可自動消除光源強度變化引起的誤差。其中單波長雙光束紫外-可見分光光度計最為常用,其結構具有典型代表性,見圖1-3。

圖1-3 單波長-雙光束紫外-可見分光光度計的結構圖

(M1、M2、M3、M4均為反射鏡)

(3)雙波長分光光度計

由同一光源發出的光被分為兩束,分別經過兩個單色器,得到兩束不同波長的單色光,再利用斬光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池,信號經檢測器檢測與處理后,由檢測器檢出兩個波長處的吸光度差值ΔA(ΔA=)。

1.2.2 儀器組成部分

(1)光源

由鎢燈和氘燈組成,在整個紫外和可見光譜區可以發射連續光譜,具有足夠的輻射強度、較好的穩定性和較長的使用壽命。鎢燈提供可見光區的光源,波長范圍是400~2500nm。氘燈提供近紫外光區的光源,波長范圍是160~475nm。

(2)單色器

分光器由入射狹縫、反射鏡、色散元件、出射狹縫等組成。其中色散元件是分光器的關鍵部件。常用的色散元件是棱鏡和光柵。目前多數高級儀器采用光柵色散組件。

(3)樣品池

樣品池又叫比色皿或液槽,根據材料分為玻璃比色皿和石英比色皿,前者用于可見光區,后者則用于可見光區和紫外光區。洗滌時先用一份鹽酸和兩份乙醇混合的溶液浸泡,再用水清洗。一般的樣品池其固有的吸光度應小于0.005,否則要校正。

(4)檢測器

檢測器利用光電效應將透過樣品池的光信號變成可測的電信號,常用的檢測器有光電池、光電管、光電倍增管和二極管陣列檢測器等。

(5)信號指示系統

信號指示系統是將檢測器的電信號經適當放大后,用記錄器顯示和打印出來。現在大部分紫外-可見分光光度計都配有計算機,取代了原有的記錄器顯示打印,進一步利用相關軟件對紫外-可見分光光度計進行操作控制,可以很方便地將信號處理、輸出、顯示、打印出來。

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