工作任務(wù)

任務(wù)　植物組織培養(yǎng)實驗室規(guī)劃設(shè)計與預(yù)算

一、工作目標(biāo)

掌握如何組建植物組織培養(yǎng)實驗室；掌握組培中涉及的各種儀器設(shè)備和器皿用具的使用方法和注意事項。能夠獨立完成植物組織培養(yǎng)實驗室的設(shè)計；能夠?qū)M培中涉及的各種儀器設(shè)備和器皿用具進(jìn)行正確的使用。

二、場所及材料用具

組織培養(yǎng)實訓(xùn)室、超凈工作臺、高壓滅菌鍋、人工氣候箱、冰箱、天平、培養(yǎng)箱、接種器具、玻璃器具、各種培養(yǎng)瓶。

三、工作過程

（一）植物組織培養(yǎng)實驗室的規(guī)劃設(shè)計

指導(dǎo)老師先講解組織培養(yǎng)實驗室各組成部分（準(zhǔn)備室、緩沖室、無菌操作室、培養(yǎng)室、馴化室、溫室）及使用功能，然后講解實驗室生產(chǎn)安全守則及有關(guān)注意事項。

（1）準(zhǔn)備室（化學(xué)實驗室）　主要用于蒸餾水的制備，以及生理、生化分析；器皿洗滌；培養(yǎng)基制備、分裝、高壓滅菌；植物材料的預(yù)處理和試管苗的出瓶、清洗與整理工作。

（2）緩沖室　在此室內(nèi)換上經(jīng)過滅菌的衛(wèi)生服、拖鞋、戴上口罩，防止雜菌帶入無菌操作室。此室安裝有紫外燈、照明燈等。

（3）無菌操作室（無菌接種室）　主要用于材料的滅菌接種；無菌材料的繼代和叢生苗的增殖或切割嫩莖插枝生根。主要儀器設(shè)備有超凈工作臺、空調(diào)、接種工具、器械支架。

（4）培養(yǎng)室　主要用于組培苗的培養(yǎng)。主要儀器有空調(diào)、除濕機(jī)、各類顯微鏡、溫濕度計。

（5）馴化室　主要用于試管苗的馴化。

（6）溫室　主要用于試管苗移栽后的管理，要求清潔無菌，配有光溫調(diào)節(jié)裝置、通風(fēng)口等。用于試管苗不分季節(jié)的常年生產(chǎn)。

（二）植物組織培養(yǎng)實驗室的主要儀器設(shè)備的使用

（1）分注器　用于分注培養(yǎng)基。

（2）移液槍　用于配制培養(yǎng)基時添加各種母液及吸取定量植物生長調(diào)節(jié)劑時使用。

（3）過濾滅菌器　用于加熱易分解、喪失活性的生化試劑的滅菌。

（4）電爐等加熱工具　用于配制培養(yǎng)基時加熱溶解瓊脂用。

（5）酸度計　用于測量和調(diào)整培養(yǎng)基的pH值。

（6）天平　稱量化學(xué)試劑。

（7）磁力攪拌器　攪拌、溶解化學(xué)試劑。

（8）高溫高壓滅菌器　主要用于濕熱滅菌。

（9）烘箱　干熱滅菌（160～180℃/1～3h）、烘干組織（80℃）、迅速干燥洗滌后的玻璃器皿（80～100℃）。

（10）冰箱　儲存培養(yǎng)基母液、生化試劑及低溫處理材料時使用。

（11）搖床或轉(zhuǎn)床　用于進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)或液體懸浮培養(yǎng)。

（12）顯微鏡　用于觀察和解剖。

（三）植物組織培養(yǎng)實驗室的主要器具的使用

1．培養(yǎng)基配制用具

（1）燒杯　用來盛放、溶解化學(xué)藥品。

（2）容量瓶　用來配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。

（3）量筒　用來量取一定體積的液體。

（4）刻度移液管　用來量取一定體積的液體。

（5）吸管　用來吸取液體，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值及溶液定容時使用。

（6）玻璃棒　溶解化學(xué)藥劑時攪拌用。

2．培養(yǎng)容器

（1）試管　適合少量培養(yǎng)基及試驗各種不同配方時使用。

（2）三角瓶　適合各種培養(yǎng)。

（3）廣口培養(yǎng)瓶　常用作試管苗大量繁殖用。

（4）培養(yǎng)皿　在無菌材料分離和細(xì)胞培養(yǎng)時使用。

（5）封口材料　棉花塞、鋁箔、耐高溫透明塑料紙、專用蓋、蠟?zāi)ぁ?/p>

3．接種用具

（1）接種燈　用于金屬接種工具的滅菌。

（2）手持噴霧器　盛裝70%酒精，用于接種器材、外置提盒操作人員手部的表面滅菌。

（3）鑷子尖頭鑷子

（4）解剖針、解剖刀等。

（5）剪刀　用于剪取外植體材料。

4．用具的洗滌

（1）玻璃器皿的洗滌　對于新購置的玻璃器皿（器壁上或多或少留有游離的堿性物質(zhì)）使用前要先用1%的稀HCl浸泡一夜，再用肥皂水洗凈，清水沖洗后，用蒸餾水再沖一遍，晾干備用；對于用過的玻璃器皿，用清水沖洗，再用蒸餾水沖洗一遍，干后備用；對于已被污染的玻璃器皿，先在121℃高壓蒸汽條件下滅菌30min后，倒去殘渣，用毛刷刷去器皿壁上的污染物，再用清水沖洗干凈，蒸餾水淋洗一遍，晾干備用。

（2）金屬用具的洗滌　對于新購置的金屬用具（表面有一層油脂）要先擦凈油脂后再用熱肥皂水洗凈，清水沖洗后，擦干備用；對于用過的金屬用具用清水洗凈，擦干備用。

5．用具的滅菌

參見表1-1。

四、考核內(nèi)容與評分標(biāo)準(zhǔn)

1．相關(guān)知識

（1）組培實驗室各個環(huán)節(jié)設(shè)施功能和設(shè)計原理（10分）。

（2）各個儀器設(shè)備的使用方法和注意事項（20分）。

（3）各個器具用品的規(guī)范使用方法。（20分）

2．操作技能

（1）設(shè)計組培實驗室技能（20分）。

（2）掌握組培相關(guān)儀器設(shè)備的使用技能（10分）。

（3）熟練相關(guān)用具的使用、洗滌和滅菌技能（20分）。