三、可見分光光度計

用來記錄和測量待測物質對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計。常用可見分光光度計有721型和722型分光光度計，主要的區別是721型分光光度計使用棱鏡為分光系統，722型分光光度計以光柵為分光系統。現以722型光柵分光光度計為例，介紹可見分光光度計的使用方法。

1.722型光柵分光光度計的工作原理

722型分光光度計以碘鎢燈為光源，光進入單色器，經光柵衍射作用形成單色光，單色光照入吸收池被溶液吸收后，其透過光照射到光電管上被檢測，再通過數字顯示器顯示吸光度或透光度讀數。波長刻度盤下面的旋鈕可以轉動光柵角度，可以使不同波長的單色光照射到吸收池，從而改變入射波長，如圖3-15所示。

2.722型光柵分光光度計的使用方法

①預熱　儀器開機后燈及電子部分需熱平衡，需要開機預熱30min后才能穩定。

②調整波長　使用儀器上的波長旋鈕即可方便地調整儀器當前測試波長，具體波長由旋鈕左側的顯示窗顯示，讀出波長時目光垂直觀察。

③模式調節　用MODE鍵轉換TRANS（透射比）、ABS（吸光度）、FACT（濃度因子）、CONC（濃度直讀）各標尺，并由“TRANS”、“ABS”、“FACT”、“CONC”指示燈分別指示，開機初始狀態為TRANS，每按一次順序循環。

④調零0%T　調節到測試所需波長后，按功能鍵調至透光率燈亮。打開試樣蓋或用不透光材料在樣品室中遮斷光路，然后按“0%T”鍵，即能自動調整零位。

⑤調整100%T　將空白樣品置入樣品室光路中，蓋下試樣蓋（同時打開光門），按下“100%T”鍵即能自動調整100%，進入正確測試狀態。

⑥測量　按功能調至吸光度燈亮。儀器試樣槽架有四個位置，用儀器前面的試樣槽拉桿可以改變試樣槽位置，讓不同樣品進入光路，即可測出樣品的吸光度。

樣品槽中的樣品位置最靠近測試者的為“1”位置，一般在“1”號位放入空白樣品，其他依次為“2”“3”“4”位置，常放置被測樣品。對應拉桿推向最內為“1”位置，依次向外拉出相應為“2”“3”“4”位置，當拉桿到位時有定位感，到位時請前后輕輕推動一下，以確保定位正確。