三、可見(jiàn)分光光度計(jì)

用來(lái)記錄和測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)。常用可見(jiàn)分光光度計(jì)有721型和722型分光光度計(jì)，主要的區(qū)別是721型分光光度計(jì)使用棱鏡為分光系統(tǒng)，722型分光光度計(jì)以光柵為分光系統(tǒng)?，F(xiàn)以722型光柵分光光度計(jì)為例，介紹可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法。

1.722型光柵分光光度計(jì)的工作原理

722型分光光度計(jì)以碘鎢燈為光源，光進(jìn)入單色器，經(jīng)光柵衍射作用形成單色光，單色光照入吸收池被溶液吸收后，其透過(guò)光照射到光電管上被檢測(cè)，再通過(guò)數(shù)字顯示器顯示吸光度或透光度讀數(shù)。波長(zhǎng)刻度盤(pán)下面的旋鈕可以轉(zhuǎn)動(dòng)光柵角度，可以使不同波長(zhǎng)的單色光照射到吸收池，從而改變?nèi)肷洳ㄩL(zhǎng)，如圖3-15所示。

2.722型光柵分光光度計(jì)的使用方法

①預(yù)熱　儀器開(kāi)機(jī)后燈及電子部分需熱平衡，需要開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min后才能穩(wěn)定。

②調(diào)整波長(zhǎng)　使用儀器上的波長(zhǎng)旋鈕即可方便地調(diào)整儀器當(dāng)前測(cè)試波長(zhǎng)，具體波長(zhǎng)由旋鈕左側(cè)的顯示窗顯示，讀出波長(zhǎng)時(shí)目光垂直觀察。

③模式調(diào)節(jié)　用MODE鍵轉(zhuǎn)換TRANS（透射比）、ABS（吸光度）、FACT（濃度因子）、CONC（濃度直讀）各標(biāo)尺，并由“TRANS”、“ABS”、“FACT”、“CONC”指示燈分別指示，開(kāi)機(jī)初始狀態(tài)為T(mén)RANS，每按一次順序循環(huán)。

④調(diào)零0%T　調(diào)節(jié)到測(cè)試所需波長(zhǎng)后，按功能鍵調(diào)至透光率燈亮。打開(kāi)試樣蓋或用不透光材料在樣品室中遮斷光路，然后按“0%T”鍵，即能自動(dòng)調(diào)整零位。

⑤調(diào)整100%T　將空白樣品置入樣品室光路中，蓋下試樣蓋（同時(shí)打開(kāi)光門(mén)），按下“100%T”鍵即能自動(dòng)調(diào)整100%，進(jìn)入正確測(cè)試狀態(tài)。

⑥測(cè)量　按功能調(diào)至吸光度燈亮。儀器試樣槽架有四個(gè)位置，用儀器前面的試樣槽拉桿可以改變?cè)嚇硬畚恢?，讓不同樣品進(jìn)入光路，即可測(cè)出樣品的吸光度。

樣品槽中的樣品位置最靠近測(cè)試者的為“1”位置，一般在“1”號(hào)位放入空白樣品，其他依次為“2”“3”“4”位置，常放置被測(cè)樣品。對(duì)應(yīng)拉桿推向最內(nèi)為“1”位置，依次向外拉出相應(yīng)為“2”“3”“4”位置，當(dāng)拉桿到位時(shí)有定位感，到位時(shí)請(qǐng)前后輕輕推動(dòng)一下，以確保定位正確。