任務3.3 醌類的提取與分離技術
3.3.1 提取技術
自然界中的醌類化合物存在形式不固定，有些以游離苷元形式存在，有些以糖苷的狀態(tài)存在，有些以鹽的形式存在。因此，提取時應根據其存在形式選取不同的提取方法。
（1）醇提取法
蒽醌類化合物常以游離狀態(tài)及苷的形式共存于植物中，提取時，常選用乙醇或甲醇作為提取溶劑，可以把不同類型、不同存在狀態(tài)、性質各異的蒽醌類成分都提取出來，所得的總蒽醌混合物再進一步純化和分離。需要注意的是，對于蒽醌苷類的提取應注意酶、酸、堿的作用，防止其被水解；對于游離的羧基、多羥基蒽醌類應注意他們有時以鹽的形式存在，提取時應預先用酸酸化使之轉化為游離形式再提取。
（2）有機溶劑提取法
苯醌和萘醌多呈游離狀態(tài)，極性較小。故常用三氯甲烷、苯等親脂性有機溶劑提取，提取液進行濃縮，如果有效成分在提取液中濃度較高，雜質較少，容易從溶液中結晶析出，必要時可繼續(xù)進行重結晶等精制處理。如中藥紫草中的紫草素的提取，先用苯、石油醚處理后，再用堿溶酸沉法分離出紫草素，如圖3.1所示。
圖3.1 紫草素提取流程示意圖
（3）堿提酸沉法
結構中含有游離酚羥基或羧基的蒽醌類化合物，能與堿成鹽而溶解于堿水溶液中，提取液加酸酸化后酚羥基或羧基游離而沉淀析出。
（4）其他方法
小分子苯醌類及萘醌類化合物具有揮發(fā)性，可用水蒸氣蒸餾法將其從藥材中提出。有些游離的醌類化合物具有升華性，常壓下加熱即能升華而不分解，故可用升華法進行提取。近年來，超臨界流體萃取法和超聲提取在醌類成分提取中也有一定應用，如大黃蒽醌超臨界流體萃取、紫草色素超臨界萃取、CO2超臨界流體萃取丹參中的有效成分等。既提高了提取效率，又避免了長時間加熱對醌類結構產生的破壞。
3.3.2 分離技術
（1）蒽醌苷與游離蒽醌衍生物的分離
游離蒽醌與蒽醌苷類極性相差較大，在有機溶劑中溶解度差異大，可以據此將兩者進行分離。將含有醌類化合物的乙醇提取液濃縮后，用水溶解，再選用與水不相混溶的有機溶劑反復萃取，游離蒽醌轉溶于有機溶劑中，而苷仍留于水溶液中。常用的有機溶劑是三氯甲烷、苯、乙醚。水溶液若再以正丁醇萃取，苷類可轉移至正丁醇中而與水溶性雜質分離。也可將濃縮液減壓蒸干，置回流提取器中，用三氯甲烷等有機溶劑提取游離蒽醌衍生物，蒽醌苷則留在殘渣內。
（2）游離蒽醌衍生物的分離
分離游離醌類衍生物一般采取溶劑分步結晶、pH梯度萃取法和色譜法。對于結構差別大的醌類混合物，可利用不同極性的溶劑分別萃取分離。
①pH梯度萃取法 是分離游離蒽醌衍生物最經典的方法。即可用堿性強度由弱至強的不同水溶液，分別從有機溶劑中提取酸性由強到弱的游離蒽醌衍生物，從而達到使酸性強弱不同的羥基蒽醌類化合物得以分離的目的。
pH梯度萃取法適用于酸性差別較大的游離羥基蒽醌類化合物的分離。如圖3.2所示。
圖3.2 pH梯度萃取法分離游離羥基蒽醌的流程示意圖
②色譜法 該法對蒽醌衍生物的分離效果好，一般用經典方法對蒽醌類化合物進行初步分離后，再結合柱色譜或制備性薄層色譜作進一步分離。游離蒽醌衍生物多用吸附柱色譜加以分離，但羥基蒽醌能與氧化鋁形成牢固的螯合物，難以洗脫，一般用硅膠、磷酸氫鈣、聚酰胺等為吸附劑。用磷酸氫鈣作吸附劑時，需經一定處理才能獲良好結果。
一般酸性強的蒽醌衍生物被吸附的性能也強，羥基蒽醌類成分比羥基蒽酚類成分容易吸附。某些蒽醌衍生物成分，由于酸性很相似，被吸附的程度也很相似，用柱色譜也難以完全分離，可將混合物乙酰化轉變?yōu)橐宜狨ズ笤龠M行色譜分離。
（3）蒽醌苷類化合物的分離
蒽醌苷類因其分子中含有糖，故極性較大，水溶性較強，因此分離較困難，一般不易得到純品。需要結合吸附或分配柱色譜進行分離，常用的吸附劑有聚酰胺、纖維素及葡聚糖凝膠等。在分離前需要用鉛鹽法或溶劑法除去大部分雜質，制得較純總苷后，再上柱色譜分離。
應用聚酰胺為吸附劑的色譜柱，對羥基蒽醌衍生物成分的分離效果良好。應用葡聚糖凝膠分子篩結合色譜法分離蒽醌苷也能獲得滿意的效果。