任務(wù)2.3　糖類(lèi)和苷類(lèi)的提取分離

2.3.1　糖類(lèi)的提取分離

糖類(lèi)是極性較大的成分，能溶于水和稀醇，不溶于極性小的溶劑，從中藥中提取單糖和低聚糖時(shí)，常用水或稀醇作為提取溶劑進(jìn)行提取。由于多種物質(zhì)共存的助溶作用，用乙醇（甲醇）回流提取也可提出單糖和一些低聚糖。若共存有酸性成分，還應(yīng)用碳酸鈣、碳酸鈉等中和，盡量在中性條件下提取。

從中藥中提取單糖及低聚糖的一般方法如下：

多糖常與其他成分共存于中藥中，可利用多糖溶于水不溶于乙醇的性質(zhì)，用水作提取溶劑加熱提取，再將水提液濃縮后加乙醇、甲醇或丙酮使多糖從提取液中沉淀出來(lái)，達(dá)到初步純化的目的。根據(jù)多糖的具體性質(zhì)的不同，有的也可用稀醇、稀堿、稀鹽溶液或二甲基亞砜提取。多糖的分離純化目前多采用凝膠濾過(guò)色譜法較為理想，分子大小不同的多糖在分離過(guò)程中不斷擴(kuò)散和排阻，大分子多糖先流出，小分子多糖后流出。常用的葡聚糖凝膠有Sephadex G-50、G-75、G-150等。另外纖維素陰離子交換樹(shù)脂法也是較為常用的方法。

2.3.2　苷類(lèi)的提取分離

（1）苷類(lèi)的提取

在植物體內(nèi)苷類(lèi)常與能水解苷的酶共存于不同的細(xì)胞中，因此在提取苷時(shí)必須明確提取的目的要求，即要求提取的是原生苷、次生苷，還是苷元，然后，根據(jù)要求進(jìn)行提取。若提取原生苷必須設(shè)法抑制或破壞酶的活性，常用的方法有：①在中藥中加入一定量的碳酸鈣；②采用甲醇、乙醇或沸水提取；③在提取過(guò)程中還須盡量勿與酸和堿接觸，以免苷類(lèi)為酸和堿水解，否則，得到的不是原生苷而是已水解失去一部分糖的次生苷，甚至是苷元。若提取次生苷，要注意保持酶的活性，可將原料用35℃左右的溫水?dāng)噭蚝蠓胖?4h，使其原生苷被酶水解。工業(yè)上也可用發(fā)酵的方法來(lái)達(dá)到酶解的目的。

各種苷類(lèi)分子中，由于苷元結(jié)構(gòu)的不同，所連接糖的數(shù)目和種類(lèi)也不一樣，很難有統(tǒng)一的提取方法，如果用極性不同的溶劑按極性由小到大次序進(jìn)行提取，則在每一提取部分，都可能有苷的存在。苷類(lèi)的系統(tǒng)溶劑提取流程如下：

（2）苷類(lèi)的分離

苷類(lèi)是極性較大的成分類(lèi)型，且基本上是非結(jié)晶性物質(zhì)，分離較為困難，在提取后一般先經(jīng)初步精制除去大量雜質(zhì)，再用色譜法分離。

初步精制的方法有溶劑法和大孔樹(shù)脂法。溶劑法是將粗提物溶于少量甲醇（水），再滴加丙酮（或乙醚），使苷類(lèi)沉淀析出而精制。大孔樹(shù)脂法是將粗提物溶于水，上孔樹(shù)脂柱，先用水洗去無(wú)機(jī)鹽、糖、肽類(lèi)等水溶性成分，再用逐步增加濃度的稀醇洗脫苷類(lèi)，此法也可用于苷類(lèi)的分離。

苷類(lèi)的分離一般要綜合應(yīng)用各種色譜法，包括高效液相色譜等，才能彼此分離。常用的有硅膠、反相硅膠、葡聚糖凝膠、活性炭、纖維素、聚酰胺、離子交換樹(shù)脂等色譜材料。