技能實訓1.2　紙色譜練習

【實驗目的】

1.了解用紙色譜法定性分析及提純化合物的原理；

2.熟悉并掌握紙色譜的基本操作。

【實驗原理】

紙色譜屬于分配色譜，利用不同化合物在流動相與濾紙吸附的固定相之前的分配比的差異進行分離。

【實驗儀器和試劑】

1.儀器：條形濾紙片，圓形濾紙，培養皿，色譜缸，吹風機，噴瓶，剪刀。

2.試劑：1%乳糖，1%葡萄糖，正丁醇1瓶，95%乙醇，蒸餾水，苯胺-鄰苯二甲酸-正丁醇（水飽和）（0.93g∶1.66g∶100mL）。

【實驗方法與步驟】

1.取濾紙，剪裁成5cm×10cm大小濾紙條，圓形濾紙按照前文紙色譜操作方法剪裁。

2.濾紙條用鉛筆在距下端點約1cm處畫起始線，點樣距約1.8cm，試劑分別為1%葡萄糖、1%乳糖的水溶液、兩種等體積混合物。圓形濾紙在靠近圓心處點樣，方法同上。

3.展開劑為正丁醇︰乙醇︰水（4︰1︰2.2）（BEW），待展開劑上升約7cm時，取出作終點線后在紅外燈下烘干。

4.干燥后噴上顯色劑顯色。

5.測出顯色點與起始線的距離和展開劑上升距離，并計算比移值Rf。

【實驗結果與分析】

1. Rf記錄。

2.實驗紙色譜為正相還是反相？為什么？

3.糖顯色劑顯色的原理是什么？