任務二 樣品檢測與數據采集
任務引入
紫外-可見分光光度法測黃楊寧片，需要進行顯色處理嗎？操作復雜嗎？
任務目標
1.會填寫原始記錄表格。
2.會配制所需的標準溶液。
3.會樣品處理。
工作頁
（一）任務分析
1.明晰任務流程
2.任務難點分析
萃取操作。
3.條件需求與準備
（1）儀器
①紫外-可見分光光度計。
②容量瓶：250mL、100mL。
③水浴鍋。
④離心機。
（2）試劑
①甲醇。
②0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液。
③溴麝香草酚藍溶液（72mg/L）。
④氯仿。
⑤無水硫酸鈉。
⑥環維黃楊星D對照品。
（二）任務實施
活動1 試劑配制
活動2 對照品溶液的制備
精密稱取環維黃楊星D對照品約25mg，置250mL容量瓶中，加甲醇70mL使溶解，用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL至100mL容量瓶中，用0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL含環維黃楊星D10μg）。
知識鏈接
對照品系指用于鑒別、檢查、含量測定的標準物質，對照品由國務院藥品監督管理部門指定的單位制備、標定和供應，除了另有規定外，對照品應置于五氧化二磷減壓干燥器中干燥12h以上使用。對照品的建立或變更其原有活性成分的含量，應與原對照品進行對比，并經過協作標定和一定的工作程序進行技術審定。對照品應附有使用說明書，標明質量要求、使用期限和裝量等。
活動3 供試品溶液的制備
取供試品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當環維黃楊星D0.5mg），置50mL容量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至近刻度，80℃水浴恒溫1.5h后取出，冷卻至室溫，加0.05mol/L磷酸二氫鈉緩沖液至刻度，搖勻，離心6min（轉速為3000r/min），取上清液，即得。
活動4 顯色及萃取
精密量取上述供試品溶液與對照品溶液各5mL，分別置分液漏斗中，各精密加入溴麝香草酚藍溶液5mL，搖勻，立即分別精密加入氯仿10mL，振搖2min，靜置1.5h，分取氯仿層，置于含0.5g無水硫酸鈉的具塞試管中，振搖，靜置，取上層清液進行測定。
知識鏈接
供試品本身在紫外-可見區沒有強吸收，或在紫外區雖有吸收但為了避免干擾或提高靈敏度，可加入適當的顯色劑顯色后測定。用比色法測定時，由于顯色時影響顯色深淺的因素較多，應取供試品與對照品或標準品同時操作。除另有規定外，比色法所用的空白指用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應試劑，并用同樣方法處理。在規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度后，按比較法公式計算供試品的濃度。
活動5 數據測定
使用紫外-可見分光光度計，分別在410nm波長處，以氯仿為參比，測定對照品和供試品的吸光度，填入表3-3。
知識鏈接
測定時，除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸光度，或由儀器在規定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規定外，吸收峰波長應在規定的波長±2nm以內，并以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸光度讀數，以在0.3～0.7之間為宜。
儀器的光譜帶寬應小于供試品吸收帶半寬度的1/10，否則測得的吸光度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸光度不再增大為準。
由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度后應減去空白讀數，或由儀器自動扣除空白讀數后再計算含量。
采用對照品比較法時，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100％±10％，所用溶劑也應完全一致。
含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用范圍均不能小于截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm。另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸光度。溶劑和吸收池的吸光度，在220～240nm范圍內不得超過0.40，在241～250nm范圍內不得超過0.20，在251～300nm范圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。
（三）任務實施記錄（見表3-3）
表3-3 黃楊寧片中環維黃楊星D含量檢測原始記錄
（四）任務評估（見表3-4）
表3-4 任務評價表 日期
思考題
簡答題
1.何謂對照品？
2.分光光度法測定環維黃楊星D的顯色劑是什么？萃取劑是什么？空白溶液是什么？測定波長是多少？