必 備 知 識(shí)

一、試管苗的特點(diǎn)

組織培養(yǎng)獲得的試管苗長(zhǎng)期生長(zhǎng)在試管或三角瓶等中，與外界環(huán)境相對(duì)隔離，形成了一個(gè)獨(dú)特的生態(tài)系統(tǒng)。這個(gè)生態(tài)系統(tǒng)與外界環(huán)境相比具有以下四個(gè)特點(diǎn)。

1．高溫且恒溫

試管苗整個(gè)生長(zhǎng)過程通常均采用恒溫培養(yǎng)，溫度一般控制在25℃±2℃，即使有變化，溫差也是極小的；并且在培養(yǎng)過程中，有的植物需將溫度控制得更高。

2．高濕

植物組織培養(yǎng)過程中一方面試管苗吸收的水分通過葉面氣孔蒸騰到培養(yǎng)瓶中，另一方面培養(yǎng)基中的水分也向培養(yǎng)瓶中蒸發(fā)，而后水汽凝結(jié)又進(jìn)入培養(yǎng)基，這種循環(huán)就是培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的水分循環(huán)，結(jié)果造成培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)空氣的相對(duì)濕度接近于100%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于培養(yǎng)瓶外的空氣濕度。

3．弱光

組織培養(yǎng)中的光強(qiáng)與太陽光相比一般較弱，因此幼苗一般生長(zhǎng)較弱，經(jīng)受不了太陽光的直接照射。

4．無菌

試管苗的培養(yǎng)是在無菌條件下的。而在移栽過程中試管苗要經(jīng)歷由無菌向有菌的轉(zhuǎn)換。若不注意，就會(huì)導(dǎo)致試管苗移栽過程中的死亡。

另外，試管苗還處在一種特殊的氣體環(huán)境中。以上這些特點(diǎn)決定了試管苗在移栽前需要進(jìn)行一段時(shí)間的馴化。

二、試管苗馴化移栽的目的

高溫、高濕、弱光和無菌條件下培育出來試管苗與實(shí)生苗相比形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能上存在一定的差異（表4-1），對(duì)逆境的適應(yīng)和抵抗能力差。因此，已生根的試管苗在移栽前要先進(jìn)行鍛煉，使試管苗適應(yīng)移栽后的環(huán)境并進(jìn)行自養(yǎng)，這是一個(gè)逐步鍛煉和適應(yīng)的過程，這個(gè)過程叫馴化。馴化的目的在于通過人工控水、控肥、增光、降溫等措施，使試管苗逐漸適應(yīng)外界環(huán)境，提高試管苗對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)性，提高其光合作用的能力，促使試管苗健壯，最終達(dá)到提高試管苗移栽成活率的目的。

三、馴化移栽的設(shè)施與設(shè)備

（一）保護(hù)栽培設(shè)施

1．現(xiàn)代化溫室

試管苗生根后不能直接移入大田，需要移入溫室過渡，而且要求溫室有較好的栽培條件，盡量實(shí)現(xiàn)機(jī)械化、自動(dòng)化。最好建成較先進(jìn)的現(xiàn)代化溫室，框架采用鍍鋅鋼材，屋面用鋁合金材料做桁條，覆蓋物可采用玻璃、玻璃鋼、塑料板材或塑料薄膜溫室，溫室借助縱向側(cè)柱或柱網(wǎng)連接起來，相互通連，可以連續(xù)搭接成聯(lián)棟的大型溫室（圖4-1），每棟可達(dá)數(shù)千至上萬平方米。冬季通過熱水、蒸汽、熱風(fēng)加溫，夏季采用通風(fēng)與遮陽相結(jié)合的方法降溫。整棟溫室的加溫、通風(fēng)、遮陽和降溫等工作可全部或部分由電腦控制。內(nèi)裝噴灌設(shè)備和可移動(dòng)苗床，有利于試管苗及優(yōu)良種苗的大批量生產(chǎn)，但造價(jià)較高。

2．日光溫室

現(xiàn)代化溫室造價(jià)較高，因此，如沒有條件也可用日光溫室代替（圖4-2）。日光溫室在北方地區(qū)應(yīng)用較為廣泛，又稱鋼拱式日光溫室，主要利用太陽能作熱源提高室內(nèi)溫度。跨度一般為5～7m，中高2.4～3.0m，后墻高1.6～2.0m，厚50～80cm，用磚砌成，每隔4～5m設(shè)通風(fēng)口，采光、保溫等性能較好，且建造成本較低。保護(hù)栽培設(shè)施的建造還要考慮到當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件，選擇適宜的保護(hù)設(shè)施或?qū)ο嚓P(guān)設(shè)施進(jìn)行改進(jìn)。

3．遮陰防雨拱棚

溫室鍛煉后的試管苗有些可以直接進(jìn)入市場(chǎng)，有些還需要移入露地?zé)捗鐖?chǎng)作進(jìn)一步馴化培養(yǎng)。露天煉苗場(chǎng)可以是完全露天，也可以建遮陰防雨棚，以防止太陽曝曬和大雨沖刷損傷幼苗，它是試管苗二次煉苗的場(chǎng)地，也是種苗等待進(jìn)入市場(chǎng)的存放地。其最好建在地勢(shì)較高，不淹水的地方，以防大雨淹沒。其骨架一般可采用鍍鋅薄壁鋼管拱棚（圖4-3）、竹木結(jié)構(gòu)拱棚（圖4-4）、鋼管結(jié)構(gòu)焊接拱棚，在頂部蓋塑料薄膜，四周通風(fēng)，再覆蓋遮陰材料。遮陰材料既可使用遮陽網(wǎng)，又可就地取材，用高粱秸、蘆葦、香蒲等物編織成遮陰簾，甚至還可利用透光率較低的舊塑料棚膜等。

4．防蟲紗網(wǎng)棚

若繁殖的苗木是脫毒苗則需要建造防蟲紗網(wǎng)棚，目的是防止蚜蟲侵入傳播病毒病。一般防蟲紗網(wǎng)棚以35～40目尼龍紗網(wǎng)為覆蓋物。由于其質(zhì)輕，因此，防蟲紗網(wǎng)棚的骨架比塑料薄膜棚承重小，構(gòu)建成本低。

（二）基質(zhì)選用與消毒

1．基質(zhì)類型

基質(zhì)具有良好的物理特性和化學(xué)特性，在固定幼苗的同時(shí)還具有持水、緩沖和提供部分養(yǎng)分、改善根際透氣性的能力。

基質(zhì)種類分有機(jī)基質(zhì)和無機(jī)基質(zhì)。

有機(jī)基質(zhì)主要有泥炭、炭化稻殼、花生殼、椰糠、木屑等。通常泥炭和炭化稻殼應(yīng)用較為廣泛。用花生殼、椰糠作為基質(zhì)時(shí)需進(jìn)行沖洗和高溫消毒。而木屑由于含有毒成分，特別是酚類化合物，因此使用前最好進(jìn)行水沖洗或高溫燜制等預(yù)處理。

無機(jī)基質(zhì)主要有爐渣、河沙、蛭石、珍珠巖等。充分燃燒的煤炭爐渣粉碎后先用3mm孔徑的篩子過篩，再用2mm孔徑的篩子篩出直徑2～3mm的爐渣，用水沖洗備用。河沙粒徑一般以0.1～2.0mm為宜。

2．基質(zhì)的混配

上述基質(zhì)除了單獨(dú)應(yīng)用外，也可根據(jù)當(dāng)?shù)刭Y源優(yōu)勢(shì)，采用多種基質(zhì)混合使用。一般選用2～3種基質(zhì)混合使用，如泥炭∶蛭石＝1∶1。

3．基質(zhì)消毒

許多固體基質(zhì)在使用前或長(zhǎng)期使用過程中可能會(huì)含有一些病菌或蟲卵，容易引發(fā)病蟲害。因此，基質(zhì)充分混勻后要進(jìn)行消毒，如基質(zhì)中混配有土，消毒更應(yīng)嚴(yán)格。消毒的方法包括蒸汽消毒、微波消毒及藥劑消毒。

（1）蒸汽消毒　蒸汽消毒可以防治猝倒病、立枯病、枯萎病、菌核病和黃瓜花葉病毒病等。基質(zhì)量少時(shí)，可用容積1～2m³的柜或箱，箱內(nèi)裝好基質(zhì)后進(jìn)行噴濕處理，使基質(zhì)含水量達(dá)到35%～45%，然后通入蒸汽，一般在70～90℃條件下，消毒15～30min，就能殺死病菌。如需消毒的基質(zhì)量大，可將混勻后含水量達(dá)到35%～45%的基質(zhì)堆成20cm高，長(zhǎng)度依地形而定的，全部基質(zhì)用防水耐高溫的布蓋住，通入70～90℃蒸汽1h。如基質(zhì)中含有土則蒸汽的溫度需達(dá)到90～100℃。這種方法消毒快，又沒有殘毒，是良好的消毒方法。

（2）微波消毒　微波消毒是用微波照射基質(zhì)，能殺滅雜草、線蟲和病菌。行走式微波消毒機(jī)由功率30kW發(fā)射裝置和微波發(fā)射板組成，前進(jìn)速度為0.2～0.4km/h，工作效率較高。

（3）藥劑消毒

① 40%甲醛　甲醛是良好的殺菌劑，但殺蟲效果較差。一般用40%的甲醛50倍液，按20～40L/m³的藥液量進(jìn)行消毒，消毒效果較好。基質(zhì)消毒時(shí)要求工作人員操作時(shí)戴上口罩，做好防護(hù)工作。

② 高錳酸鉀　高錳酸鉀是強(qiáng)氧化劑，一般用在石礫、粗沙等沒有吸附能力且較容易用清水沖洗干凈的惰性基質(zhì)上消毒，而不能用于泥炭等有較大吸附能力的活性基質(zhì)或者難以用清水沖洗干凈的基質(zhì)。

③ 氯化苦　氯化苦能夠有效防治線蟲、昆蟲及一些草籽。氯化苦熏蒸的適宜溫度為15～20℃。熏蒸前要求基質(zhì)稍濕潤，將混勻的基質(zhì)堆放成高30cm，長(zhǎng)度根據(jù)具體條件而定的基質(zhì)堆，在基質(zhì)上方每隔30cm打一個(gè)深為10～15cm的孔，每孔注入氯化苦5mL，隨即將孔堵住，第一層打孔放藥后，再在其上堆同樣的基質(zhì)一層，打孔放藥，共處理3～4層，然后覆膜。7～10d后揭膜，晾7～8d干燥后即可使用。氯化苦對(duì)活的植物組織和人有毒害作用，所以施用時(shí)要注意安全。

④ 福爾馬林消毒　福爾馬林能防治猝倒病和菌核病。用0.5%的福爾馬林噴灑床土，混拌均勻，然后堆放并用塑料薄膜封閉5～7d，揭開塑料薄膜使藥味徹底揮發(fā)后方可使用。

⑤ 65%的代森鋅粉劑　每立方米苗基質(zhì)用藥60g，混拌均勻后用塑料薄膜蓋2～3d，然后撤掉塑料薄膜，待藥味散后即可使用。

⑥ 威百畝　威百畝是一種水溶性熏蒸劑，對(duì)雜草、大多數(shù)線蟲和真菌有效，可作為噴灑劑通過供液系統(tǒng)灑在基質(zhì)的表面。也可把1L威百畝加入10～15L水中，均勻噴灑在10m³的基質(zhì)表面，施藥后將基質(zhì)密封，7～10d后可以使用。

四、馴化移栽

（一）煉苗

煉苗一般是將生根狀態(tài)理想的試管苗（一般具有3～4條根，根長(zhǎng)1～2cm）移入溫室內(nèi)，開始時(shí)保持與培養(yǎng)室比較接近的環(huán)境條件，適當(dāng)遮光，提高濕度，以后逐漸撤除保護(hù)，使光照條件接近自然生長(zhǎng)環(huán)境。經(jīng)過一定時(shí)間的鍛煉，打開封口材料，向瓶?jī)?nèi)加適量自來水，逐漸降低環(huán)境溫度，轉(zhuǎn)向有菌培養(yǎng)，使幼苗周圍的環(huán)境逐步與自然環(huán)境相似。時(shí)間一般以7d左右為宜。

（二）移栽

1．常規(guī)移栽法

常規(guī)移栽法是指將試管苗在生長(zhǎng)素濃度高的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，當(dāng)獲得大量的不定根后，打開培養(yǎng)瓶注入少量自來水，在半遮光下馴化3～5d，然后取出試管苗，在20℃的溫水中浸泡10min，換水兩次，將黏附于試管苗根部的培養(yǎng)基洗洗凈，移栽到裝有經(jīng)過消毒處理基質(zhì)的育苗盤或育苗缽中，保持一定的溫度和水分，當(dāng)長(zhǎng)出2～3片新葉時(shí)，就可將其移栽到田間或盆缽內(nèi)。移栽的基質(zhì)要根據(jù)不同植物的栽培習(xí)性來進(jìn)行配制，這樣才能獲得滿意的栽培效果。

2．嫁接移栽法

嫁接移栽法是指取生長(zhǎng)良好的同一植物的實(shí)生苗或幼苗作砧木，用試管苗作接穗進(jìn)行嫁接的方法。試管苗的嫁接移栽法移栽成活率高、適用范圍廣、所需的時(shí)間短，有利于移栽植株的生長(zhǎng)發(fā)育。

3．直接移栽法

直接移栽法是指直接將試管苗移栽到盆缽中的方法。

（三）成苗管理

試管苗移栽后1～2周為關(guān)鍵管理階段，主要是光照、水分、通風(fēng)、透氣等方面的管理。根據(jù)試管苗的特點(diǎn)及其生境與田間環(huán)境差異，馴化應(yīng)從溫度、濕度、光照及有無菌等環(huán)境要素進(jìn)行，前期創(chuàng)設(shè)與試管苗原來生境相似的條件，后期則要與移栽的條件相似，從而達(dá)到逐步適應(yīng)的目的，有效提高移栽成活率。

1．溫度

試管苗比較嬌嫩，從培養(yǎng)瓶中移到溫室中，溫度要盡可能保持一致，不同作物對(duì)溫度要求不同，一般植物生長(zhǎng)的最適溫度，喜溫植物以25℃為宜，喜涼植物則以18～20℃為宜。同時(shí)如果基質(zhì)溫度（即苗床溫度）高于空氣溫度2～3℃有利于促進(jìn)生根和根系的發(fā)育。

2．濕度

培養(yǎng)瓶中相對(duì)濕度達(dá)到99%以上，雖然溫室內(nèi)處于相對(duì)密閉的狀態(tài)，空氣濕度較大，但仍達(dá)不到培養(yǎng)瓶中的空氣濕度，故需人工噴霧調(diào)節(jié)。后期逐漸降濕保持相對(duì)濕度在70%～85%。

3．光照

試管苗在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)光合作用微弱，因此移栽前應(yīng)逐漸加強(qiáng)光照，使葉片恢復(fù)光合作用能力。但初期不宜長(zhǎng)時(shí)間照射強(qiáng)光，光照強(qiáng)度以1500～2000lx為宜，特別注意避開中午強(qiáng)光，以免損傷葉肉組織，致使小苗隨著蒸騰失水而萎蔫。后期光照可加強(qiáng)到4000～5000lx，光線不足就會(huì)造成莖葉細(xì)長(zhǎng)徒長(zhǎng)，不利于培育壯苗。冬季光照弱，光照時(shí)間短，應(yīng)加設(shè)人工光源來補(bǔ)充光照。

4．施肥

馴化期間幼苗施肥的主要方式是追肥。追肥與否、何時(shí)追肥應(yīng)視栽培基質(zhì)儲(chǔ)肥多少和幼苗的生長(zhǎng)狀況而定。一般移栽一周后每隔3～5d葉面噴施營養(yǎng)液一次，可結(jié)合噴水噴施。追肥的種類、數(shù)量應(yīng)依據(jù)苗木生長(zhǎng)需要來確定，但濃度不宜過大，應(yīng)勤施少施。

5．防止雜菌滋生

由于空氣濕度高氣溫低，幼苗易感染立枯病、猝倒病、枯葉病，造成死亡，因此要及時(shí)噴藥，防治病蟲害。通常使用一定濃度的殺菌劑可以有效地保護(hù)幼苗，如百菌清、多菌靈等，濃度為1/1000～1/800。

（四）提高試管苗移栽成活率的途徑

影響試管苗移栽成活率的因素有許多種，包括內(nèi)因與外因。不同的植株和不同的試管苗種類對(duì)移栽的具體要求不同。但總的來說，提高試管苗移栽成活率的途徑有以下幾種。

1．試管苗的生理狀況

試管苗的生理狀況是影響移栽成活率的內(nèi)在因素。同一種植物的試管苗，其壯苗比弱苗移栽后成活率高（表4-2）。

2．不同栽培基質(zhì)及消毒處理

不同栽培基質(zhì)對(duì)試管苗移栽的成活率有顯著影響（表4-3）。因此，要根據(jù)植物的特性選擇適宜的基質(zhì)。就同一栽培基質(zhì)而言，經(jīng)過消毒處理的移栽效果較好，其總生長(zhǎng)量、葉片重、根鮮重均明顯高于未經(jīng)消毒處理的。此外，采用有機(jī)基質(zhì)比無機(jī)基質(zhì)要好，復(fù)合基質(zhì)要比單一基質(zhì)好。

3．肥料

除了少數(shù)作物的試管苗葉片光合能力較強(qiáng)外，大多數(shù)作物試管苗光合能力極低。因此，要及時(shí)補(bǔ)充養(yǎng)料，移栽一周以后，即可用營養(yǎng)液葉面噴施，來快速補(bǔ)充苗株體內(nèi)養(yǎng)料，促進(jìn)早生根。3～5d噴施一次，初期濃度低些，常用0.15%～0.2%磷酸二氫鉀噴施。

4．環(huán)境因子

環(huán)境條件也影響試管苗移栽的效果，關(guān)鍵是控制好前10d的溫濕度和光照。溫度一般保持在25℃，移栽苗周圍的相對(duì)濕度初期應(yīng)保持90%～100%，以后逐漸降低，直至與自然環(huán)境相適應(yīng)。試管苗移栽后，要由異養(yǎng)轉(zhuǎn)化為自養(yǎng)，因此適宜的光照就成為組培苗進(jìn)行光合作用的必要條件，但前期光照不能太強(qiáng)，要做好適當(dāng)遮陽工作，避免太陽直射。

5．從無菌向有菌逐漸過渡

試管苗出培養(yǎng)瓶后，要將其上面的培養(yǎng)基洗凈，以免雜菌滋長(zhǎng)。第一次移栽時(shí)最好選用滅過菌的基質(zhì)，特別是對(duì)于移栽后成活率比較困難的植物，以提高其移栽成活率。為此，小苗種好后要適當(dāng)使用一定濃度的殺菌劑，如百菌清、多菌靈、托布津等，濃度為1/1000～1/800，7～10d噴施一次。

6．植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)

一般來說，生長(zhǎng)素具有促進(jìn)生根的作用，因此也能提高試管苗移栽的成活率。但植物不同選用的生長(zhǎng)素種類不同。如月季以NAA誘導(dǎo)生根和提高移栽成活率效果最好。

7．無機(jī)鹽濃度

試驗(yàn)結(jié)果表明，降低無機(jī)鹽的濃度對(duì)植物生根效果較好，有利于移栽成活。

8．活性炭

在生根培養(yǎng)中加入少量活性炭，對(duì)某些月季的嫩莖生根有良好作用，尤其是用酸、堿和有機(jī)溶劑洗過的活性炭，效果更佳。但活性炭對(duì)有些月季品種的促根生長(zhǎng)無反應(yīng)。