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第六節(jié) DNA鑒定

一、DNA鑒定技術概述

DNA技術是20世紀80年代中期興起的一項新興鑒定技術。經(jīng)過十多年的發(fā)展,DNA鑒定技術取得了突破性的成就。分子克隆、分子雜交、序列分析等新技術的發(fā)展應用,使人們得以在DNA分子水平上研究基因組DNA的差異,實現(xiàn)了物證檢驗從否定到認定的飛躍,在法庭科學史上具有劃時代的意義。目前DNA分析技術廣泛應用于殺人、強奸等案件的物證鑒定及親子鑒定、個人識別、性別鑒定等,并發(fā)揮著十分重要的作用。DNA鑒定技術已成為各國在解決親權爭議和與犯罪做斗爭中不可缺少的工具。

DNA(deoxyribonucleic acid)即脫氧核糖核酸,是一切生物體最基本的遺傳物質(zhì),位于細胞核中,與蛋白質(zhì)共同構成染色體。個體遺傳差異的本質(zhì)不是在蛋白質(zhì),而是在DNA分子水平。DNA分子是由脫氧核糖、磷酸和4種含氮堿基構成的兩條方向相反且互相纏繞的多核苷酸鏈。生物體的各種遺傳性狀均由DNA分子上的遺傳基因控制。實際上各種基因就是DNA分子鏈的各個片段。人類在進化過程中DNA不斷發(fā)生突變,DN A在復制時的序列滑動和染色體的分離、組合,形成人類DNA的個體差異和DNA的多態(tài)性。DNA鑒定技術就是利用DN A的個體差異和多態(tài)性進行親權鑒定和生物物證的個人識別。DNA分析技術主要有兩大類:DNA基因紋圖(使用探針的DNA分子雜交)和PCR技術(不使用探針的非雜交技術)。

二、DNA基因紋圖

DNA基因紋圖是指將人體基因組DNA經(jīng)過特定的限切酶消化后,經(jīng)電泳分離,薩森印跡轉移,然后用小衛(wèi)星DN A探針雜交而顯示出的高多態(tài)性圖譜。由于這些圖譜表現(xiàn)出高度的個體特異性,并遵守孟德爾遺傳規(guī)律,與人的指紋一樣具有專一性和特異性,故形象地稱之為“DNA指紋”。從理論上講,除同卵雙生子外,絕無兩個個體具有相同的DNA基因紋圖可能。英國的Jeffreys教授在1985年首先發(fā)現(xiàn)和建立了DNA基因紋圖的檢驗方法,并鑒定了一宗移民糾紛案,開創(chuàng)了人體物質(zhì)檢驗技術的新紀元。

由于DNA基因紋圖具有穩(wěn)定性、高度個體特異性的特點,并嚴格按照孟德爾方式遺傳,故可以用于個人識別和親子鑒定。DNA基因紋圖的應用,突破了傳統(tǒng)法醫(yī)物證檢驗中只能排除而不能認定的局限性,促進了法醫(yī)物證檢驗的迅速發(fā)展。但是由于DNA基因紋圖技術對檢材的要求高,所需檢材量較多,對嚴重降解的DNA檢材難以獲得準確可靠的信息、過程復雜等方面存在著局限性,此技術已基本不做。

三、PCR技術

PCR即聚合酶鏈反應,也叫DNA體外括增,是由美國1993年諾貝爾獎得主卡里·穆里斯發(fā)明的,被譽為分子生物學發(fā)展史上的又一里程碑。通過PCR技術,鑒定人員可以快速、簡便地獲得所需要的特定DNA片段。

PCR技術的基本原理是依賴于靶DNA序列側翼上所結合的兩個寡核苷酸引物經(jīng)體外酶促合成特異DNA片段的方法。其過程包括DNA熱變性,適當溫度下引物退火、引物延伸三個步驟。DNA熱變性是指加熱使模板DNA雙鏈解離變成單鏈,以便使所加入的引物與模板結合;引物退火是指在適當溫度下,使引物結合到靶DNA側翼的對應位置上;引物延伸是指引物在DNA聚合酶的催化下沿模板DNA鏈的3′-末端向5′-示端延伸。通過這三個步驟的重復循環(huán),使每次循環(huán)中目的DNA片段的拷貝數(shù)呈幾何級數(shù)增長,得以提供足夠的目的DNA量供分析使用。

PCR技術具有操作簡單、成本低、高靈敏度的特點,而且它對部分腐敗降解、高度降解的微量檢材均能有效檢出。PCR技術的高靈敏度性已能對納克級超微量檢材作出鑒定。PCR技術已基本成熟,已發(fā)展到多重PCR、自動測序階段。PCR技術不僅克服了DNA指紋技術的局限性,而且以PCR基本原理為基礎的MVR-PCR、RAPD等技術的發(fā)明應用,為刑偵工作提供了新的強有力的技術手段。目前PCR技術得到了廣泛的應用,它的研究應用已涉及醫(yī)學、考古學、法醫(yī)學、生物工程等領域。PCR技術大大地拓寬了物證檢驗范圍,被稱為法醫(yī)DNA檢驗的第二代技術。

四、DNA鑒定技術在司法中的運用

只要是含有一定量大分子DNA的新鮮與陳舊生物細胞組織或斑跡,如毛發(fā)、骨骼、血液、血斑、精液、精斑、唾液、唾液斑、毛發(fā)根、骨髓、肌肉、精液與陰道分泌液形成的混合斑等均可以進行DNA鑒定。DNA鑒定技術具有高效率的個人識別能力,對現(xiàn)場收集生物學檢材與嫌疑人樣品的同一認定接近肯定結論,故在司法應用中具有極大的價值。同時,從DNA分子上的遺傳差異獲取證據(jù),從根本上克服了以往遺傳標記檢測的各種缺陷。自1989年我國DNA基因紋鑒定技術研究獲得成功并正式用于法醫(yī)物證檢驗以來,DNA技術已經(jīng)為偵查破案發(fā)揮了重要的作用。目前,DN A鑒定技術主要應用于以下幾個方面。

(一)親子鑒定

根據(jù)孟德爾遺傳規(guī)律,子女基因型中所有的母方基因型中不存在的等位基因都應從子女的生物學父親的基因型中獲得。若爭議男性的基因中不存在這一等位基因,就為排除其是生物學上的父親提供了依據(jù)。由于DNA分子的高多態(tài)性,DNA親子鑒定在認定或排除親子關系上優(yōu)于常規(guī)血型測定。親子鑒定在解決胎兒,尤其是妊娠早期胚胎的親子鑒定等問題中有著重要的實用價值。

(二)現(xiàn)場的物證鑒定

對犯罪現(xiàn)場提取的含有DNA分子的人體組織細胞均可以進行DNA檢測。由于人類基因組DNA的遺傳穩(wěn)定性,同一個體的唾液、血液、精液以及各器官組織DNA型別一致性,并表現(xiàn)出高度個體特異性,所以對現(xiàn)場提取的物證如血斑、精斑、唾液斑等組織液和器官,均可通過提取DNA分子與檢材比較,進行同一認定,從而排除或認定嫌疑人。

(三)無名尸體的鑒定

在我國,無名尸體案件呈上升趨勢。常規(guī)個人識別方法包括顱像重合、牙齒磨耗度、恥骨聯(lián)合面形態(tài)觀察技術尚不能達到肯定的結論。而通過DNA檢測分析,所得結果的準確性遠遠高于常規(guī)檢測。只需將無名尸骨DNA分子與可疑的雙親或子女的DNA,作親權鑒定,就可以準確地確定死者身源。而且PCR技術具有高靈敏度,對高度腐敗組織、陳舊骨骼等檢材均可進行DNA分析。在空難、火災、水災等災難性事件中,許多受害者的面貌已難以辨認,這時通過DNA檢測可以準確認定死者身份。

(四)碎尸鑒定

同一個體各種器官組織的DNA型別具有一致性和穩(wěn)定性,因此可對碎尸案中尋找回來的尸塊進行DNA檢測,以確定是否來源于同一個體。將尸塊組織中的DNA與可疑雙親或子女的DNA作比較,從而可以確定死者身份。

(五)財產(chǎn)鑒定

DNA可以用來作為個人財產(chǎn)的證明標志。如將DNA涂在珍貴財產(chǎn)的隱蔽處,以備在涉及財產(chǎn)糾紛中鑒定這些財產(chǎn)所有者的財產(chǎn)權。

五、DNA鑒定技術的現(xiàn)狀與展望

DNA鑒定技術自問世以來,發(fā)展極為迅速,在我國司法領域內(nèi)得到了廣泛的應用。現(xiàn)在全國絕大部分省(直轄市、自治區(qū))廳(局)刑偵部門、省會城市公安局和部分經(jīng)濟發(fā)達城市公安部門都建立了DNA實驗室,并利用DNA技術成功地偵破了許多疑難案件。DNA鑒定技術的應用,極大地推動了人體物質(zhì)鑒定技術的發(fā)展,為法醫(yī)物證學開辟了新天地。植物DNA鑒定技術,也為一些疑難案件偵查中排查嫌疑人是否到過犯罪現(xiàn)場提供證據(jù)。

目前,我國DNA數(shù)據(jù)庫的建立尚在進行中。英國是世界上第一個建立DNA數(shù)據(jù)庫的國家,該國在1995年建立了全國范圍的DNA數(shù)據(jù)庫。DNA數(shù)據(jù)庫是將特定人群(有犯罪前科及不良行為記錄的人群)進行DNA分析,并將檢測結果輸入計算機中。在刑事偵查過程中,只需將現(xiàn)場提取的罪犯遺留的唾液、血液、毛發(fā)、精液等組織液和器官進行DNA檢測,并將檢測結果與罪犯DNA數(shù)據(jù)庫中的記錄進行比較,即可快速查找犯罪嫌疑人,大大提高了犯罪偵查的效率。

目前,DNA鑒定技術正逐步向標準化、測序化、計算機自動化和高鑒別機率方向發(fā)展。隨著人類基因組研究計劃的進展、單核苷酸的多態(tài)性的發(fā)現(xiàn)、DNA數(shù)據(jù)庫的建立、基因芯片技術的開發(fā)等,DNA鑒定技術將更加迅速、簡便、可靠、鑒別率更高。國外已成功研究出生物芯片技術,只要將待測微量樣品注入芯片入口中,終端即顯示檢測結果,操作十分簡便。隨著對DNA序列研究的深入,DNA鑒定技術將會在更大領域內(nèi)得到應用。DNA鑒定技術已成為現(xiàn)代法庭科學和生物物證檢驗的主要手段之一,其在法庭科學應用中的地位將會得到進一步加強。

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